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商品介紹：
土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶，其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性，是評價土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳,、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響,。通常按照其最適pH范圍,，分為堿性,、中性和酸性三種類型磷酸酶,。

測定原理：

堿性環(huán)境中，S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉,，通過測定酚的生成量即可計算出S-AKP/ALP活性,。

自備儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板,、臺式離心機(jī),、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平,、可調(diào)式移液器,、冰、蒸餾水,、無水乙醇和甲苯,。

產(chǎn)品名稱：土壤酸性磷酸酶(SACP)可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號：GOY-01S6830
分類：土壤系列

試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存,。
提取液二：液體50mL×1瓶,，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶,，-20℃保存,；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存,；
試劑二：液體18μL×1瓶,，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存,；
試劑三：粉劑×1瓶,，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存,；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存,；
測定步驟
1,、 分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm,，蒸餾水調(diào)零,。
2、 將試劑一,、二,、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3,、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一,，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴,，200W，破碎3s,，間歇7s,，總時間1min），然后4℃,，8000g離心10min,，取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一）,，冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min,，棄沉淀,，取上清在4℃，8000g離心10min,，取上清用于測定胞漿FBP酶活性,，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴,，200W,，破碎3s，間歇7s,，總時間1min）,，然后4℃,，8000g離心10min，取上清測定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測定總FBP酶活性,，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,，則按照步驟②提取粗酶液,。
FBP活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位,。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積,，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù),，6.22×103 L / mol /cm,；d：比色皿光徑，1cm,；V樣：加入樣本體積,，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積,，1mL,；T：反應(yīng)時間,，5 min,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量,，g。
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用,，不得用于人體臨床直接檢測,。避免給您帶來不必要的損失，請仔細(xì)閱讀購買說明,！
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溶液 ,100mg/mL1mL  TCEP 溶液,，0.5M5mL

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溶液 ,25mg/mL10mL  TBE 電泳液 ,10×2500mL

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不含15mM HEPES

不含L谷氨酰胺，不含丙酮酸鈉

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