詳細(xì)介紹
商品介紹:
土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶,,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,,是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo),。土壤磷酸酶受到土壤碳,、氮含量,、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍,,分為堿性,、中性和酸性三種類型磷酸酶。
測(cè)定原理:
堿性環(huán)境中,,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉,,通過(guò)測(cè)定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量玻璃比色皿/96孔板,、臺(tái)式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱,、分析天平,、可調(diào)式移液器、冰,、蒸餾水,、無(wú)水乙醇和甲苯。
產(chǎn)品名稱:土壤堿性磷酸酶(SAKP/ALP)可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測(cè)試方法: 可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6835
分類:土壤系列
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,,4℃保存,。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存,;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,,-20℃保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶,, 4℃保存,;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,,蒸餾水調(diào)零。
2,、 將試劑一,、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3,、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,,破碎3s,間歇7s,,總時(shí)間1min),,然后4℃,8000g離心10min,,取上清測(cè)定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),,冰浴勻漿后于4℃,,200g離心5min,棄沉淀,,取上清在4℃,,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,,取沉淀加1mL提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎3s,,間歇7s,總時(shí)間1min),,然后4℃,,8000g離心10min,,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,,按照步驟①提取粗酶液,,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液,。
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10-3 L,;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,,1cm;V樣:加入樣本體積,,0.1 mL,;V樣總:加入提取液體積,1mL,;T:反應(yīng)時(shí)間,,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,g,。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明,!
細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體 尤文肉瘤FLI1蛋白抗體
Bcr抗體 應(yīng)激誘導(dǎo)0蛋白1抗體
0酸化乳腺癌易感基因1抗體(人) 應(yīng)激誘導(dǎo)分泌蛋白1抗體
0酸化T淋巴細(xì)胞受體抗體 熒光素酶抗體
B淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體 隱花色素蛋白2抗體
大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠骨成型蛋白7(BMP7)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)elisa分析檢測(cè)試劑盒
土壤堿性磷酸酶(SAKP/ALP)可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒RIPA 裂解液 ( 弱 )100mL Sodium orthovanadate( 0酸酯酶抑制劑 )2g
NP-40 裂解液100mL Sodium Butyrate(HDAC 抑制劑 )1g
動(dòng)植物總蛋白微量提取試劑盒50 次 SOD( 抗氧化酶 )65KU
動(dòng)植物膜蛋白微量制備試劑盒50 次 SNP(NO 供體 )1g
動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒25 次 SMT(iNOS 抑制劑 )100mg