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土壤堿性磷酸酶(SAKP/ALP)可見(jiàn)分光光度法

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  • 土壤堿性磷酸酶(SAKP/ALP)可見(jiàn)分光光度法

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更新時(shí)間:2022-03-15 11:21:57瀏覽次數(shù):392

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
貨號(hào) GOY-01S6835 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅用于科研    
土壤堿性磷酸酶(SAKP/ALP)可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒公司各類熱銷產(chǎn)品Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠IgM
PE標(biāo)記的兔抗小鼠IgM
PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgM
PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠IgM
APC標(biāo)記的兔抗小鼠IgM

詳細(xì)介紹

商品介紹:
土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶,,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,,是評(píng)價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo),。土壤磷酸酶受到土壤碳,、氮含量,、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍,,分為堿性,、中性和酸性三種類型磷酸酶。

測(cè)定原理:

堿性環(huán)境中,,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉,,通過(guò)測(cè)定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。

自備儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量玻璃比色皿/96孔板,、臺(tái)式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱,、分析天平,、可調(diào)式移液器、冰,、蒸餾水,、無(wú)水乙醇和甲苯。

產(chǎn)品名稱:土壤堿性磷酸酶(SAKP/ALP)可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格50/48
測(cè)試方法可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6835
分類:土壤系列

試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,,4保存,。
提取液二:液體50mL×1瓶,4保存,。
試劑一:粉劑×1瓶,,-20保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,,用不完的試劑4保存,;
試劑二:液體18μL×1瓶,4保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4保存;
試劑三:粉劑×1瓶,,-20保存,;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,,用不完的試劑4保存;
試劑四:液體50mL×1瓶,, 4保存,;
測(cè)定步驟
1
分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,,蒸餾水調(diào)零。
2
,、 將試劑一,、二、三37(哺乳動(dòng)物)25(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3
,、 加樣表:

圖1.jpg

樣本的前處理
FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,,200W,,破碎3s,間歇7s,,總時(shí)間1min),,然后48000g離心10min,,取上清測(cè)定,。
胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)1510的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),,冰浴勻漿后于4,,200g離心5min,棄沉淀,,取上清在4,,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,,取沉淀加1mL提取液二,,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,,破碎3s,,間歇7s,總時(shí)間1min),,然后4,,8000g離心10min,,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,,按照步驟提取粗酶液,,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟提取粗酶液,。
FBP活性計(jì)算:
1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP
nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP
nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V
反總:反應(yīng)體系總體積,,1×10-3 L,;εNADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm,;d:比色皿光徑,,1cmV樣:加入樣本體積,,0.1 mL,;V樣總:加入提取液體積,1mL,;T:反應(yīng)時(shí)間,,5 minCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,,mg/mL,;W:樣本質(zhì)量,g,。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明,!
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土壤堿性磷酸酶(SAKP/ALP)可見(jiàn)分光光度法測(cè)試盒RIPA 裂解液 ( )100mL  Sodium orthovanadate( 0酸酯酶抑制劑 )2g

NP-40 裂解液100mL  Sodium Butyrate(HDAC 抑制劑 )1g

動(dòng)植物總蛋白微量提取試劑盒50   SOD( 抗氧化酶 )65KU

動(dòng)植物膜蛋白微量制備試劑盒50   SNP(NO 供體 )1g

動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒25   SMT(iNOS 抑制劑 )100mg


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