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產(chǎn)品名稱：脫氫酶(DHA)可見分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 可見分光光度法
貨號：GOY-01S6937
分類：其它系列
商品介紹：
脫氫酶(dehydrogenase, DHA) 是一類催化物質(zhì)氧化還原反應(yīng)的酶,，催化底物通過細(xì)胞色素系統(tǒng)被氧化,，釋放的能量供機(jī)體使用,，是生物體取得能量的一種方式,。

測定原理

在細(xì)胞呼吸過程中,，氫受體2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在脫氫酶作用下接受氫以后，被還原為三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF）,，TF呈現(xiàn)紅色,，于485nm測定其吸光值，即得脫氫酶活性,。

自備實(shí)驗(yàn)儀器及用品

天平,、恒溫培養(yǎng)箱或水浴鍋、低溫離心機(jī),、可見分光光度計(jì),、1mL玻璃比色皿、冰,、蒸餾水,、甲醇（不允許快遞，請用戶自備）,。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶,，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶,，4℃保存,。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存,；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶,，4℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存,；
試劑三：粉劑×1瓶,，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存,；
試劑四：液體50mL×1瓶,， 4℃保存；
測定步驟
1,、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零,。
2,、 將試劑一、二,、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘,。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴,，200W,，破碎3s，間歇7s,，總時(shí)間1min）,，然后4℃，8000g離心10min,，取上清測定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本，加入1mL提取液一）,，冰浴勻漿后于4℃,，200g離心5min，棄沉淀,，取上清在4℃,，8000g離心10min，取上清用于測定胞漿FBP酶活性,，取沉淀加1mL提取液二,，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W,，破碎3s，間歇7s,，總時(shí)間1min）,，然后4℃，8000g離心10min,，取上清測定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測定總FBP酶活性,，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,，則按照步驟②提取粗酶液,。
FBP活性計(jì)算：
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位,。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積,，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù),，6.22×103 L / mol /cm,；d：比色皿光徑，1cm,；V樣：加入樣本體積,，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積,，1mL,；T：反應(yīng)時(shí)間，5 min,；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL；W：樣本質(zhì)量,，g,。
凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體     絲氨酸羧肽酶1抗體

凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體     絲氨酸羧甲半合成酶抗體

β衣被蛋白抗體     絲氨酸蘇氨酸激酶1受體相互作用蛋白抗體

半胱胺酸蛋白酶4/11抗體     絲氨酸或半蛋白水解酶抑制蛋白1抗體

半胱胺酸蛋白酶蛋白5抗體     絲氨酸合并蛋白3抗體（腫瘤差異表達(dá)蛋白）
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脫氫酶(DHA)可見分光光度法測試盒DMSO，PCR 級1.5mL  固相 RNase 清除劑100mL

海藻糖溶液,，1.5M,，PCR 級1.5mL  鈷柱介質(zhì)10mL

甜菜堿溶液，5M,，PCR 級1.5mL  骨骼肌細(xì)胞生長因子5mL

綠如藍(lán)染料,，PCR 級0.1mL  甘肽瓊脂糖2mL

綠如藍(lán)染料，PCR 級1mL  甘肽 S 轉(zhuǎn)移酶1mg
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