商品介紹：
果糖-1,6二磷酸酶又稱果糖1,6二磷酸酯酶,，催化1,6二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和無機磷,，在糖的異生代謝和光合作用同化物蔗糖的合成中起關(guān)鍵性的作用,。

測定原理

FBP催化1,6二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和無機磷,，在反應體系中添加的磷酸葡萄糖異構(gòu)酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,，340nm下測定NADPH增加速率,，即可計算FBP活性。

需自備的儀器和用品

分光光度計/酶標儀,、恒溫水浴鍋,、臺式離心機,、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿,、研缽,、冰和蒸餾水。

產(chǎn)品名稱：果糖1,6二磷酸酶(FBP)紫外分光光度法測試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測試方法: 紫外分光光度法
貨號：GOY-01S6970
分類：糖異生系列

試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶,，4℃保存,。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存,。
試劑一：粉劑×1瓶,，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存,；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶,，-20℃保存,；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存,；
試劑四：液體50mL×1瓶,， 4℃保存；
測定步驟
1,、 分光光度計預熱30min以上,，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零,。
2,、 將試劑一、二,、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預熱10分鐘,。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴,，200W,，破碎3s，間歇7s，總時間1min）,，然后4℃,，8000g離心10min，取上清測定,。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱取約0.1g樣本,，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃,，200g離心5min,，棄沉淀，取上清在4℃,，8000g離心10min,，取上清用于測定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二,，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W,，破碎3s,，間歇7s，總時間1min）,，然后4℃,，8000g離心10min，取上清測定葉綠體中FBP酶活性,。
建議測定總FBP酶活性,，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,，則按照步驟②提取粗酶液,。
FBP活性計算：
（1）按樣本蛋白濃度計算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位,。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應體系總體積,，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù),，6.22×103 L / mol /cm,；d：比色皿光徑，1cm,；V樣：加入樣本體積,，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積,，1mL,；T：反應時間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度,，mg/mL,；W：樣本質(zhì)量，g,。
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用,，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,，請仔細閱讀購買說明,！
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