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小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-03-17 08:05:18瀏覽次數(shù):201次

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小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱:Mouse tartrate-resistant acid phosphatase 5b,TRACP-5b ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一,、標(biāo)本要求 
1
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。 
2
.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二,、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑,,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,,不同總批號(hào)的試劑不能混用,。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘,。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,標(biāo)本可存放于28℃,。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,,避免反復(fù)凍融,。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,,否則將降低精確度,,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于28℃,,請(qǐng)勿冷凍,,有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。
三,、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,,如微量移液器,,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水119倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水14倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,,按照1100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,,充分混勻待用。)
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),,每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔,、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰,、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl,。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置 30 秒后棄去,,如此 重復(fù) 5 次,拍干,。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3,。
8.洗滌:操作同 5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.
終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

C19orf46  19號(hào)染色體開放閱讀框46抗體規(guī)格: 0.2ml

GPCR GPR97  G蛋白偶聯(lián)受體97抗體規(guī)格: 0.2ml

C2orf68  2號(hào)染色體開放閱讀框68抗體規(guī)格: 0.2ml

PAI-1  纖溶酶原激活物抑制因子抗體規(guī)格: 0.1ml

Sox2  胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-SRC-3 (Thr24)  磷酸化類固醇受體輔助活化因子-3規(guī)格: 0.1ml

phospho-Tau protein(Ser396)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

TBX3  轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體規(guī)格: 0.2ml

ARHGAP32  Rho GTP酶激活蛋白32抗體規(guī)格: 0.2ml

MKLP1  有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣1抗體規(guī)格: 0.2ml

RanBP3  RAN結(jié)合蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml

TSPAN9/NET-5  四分子交聯(lián)體9/四旋蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Phospho-FADD(Ser191)  磷酸化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

Protein G  重組蛋白G抗體規(guī)格: 0.1ml

Classical swine fever virus, CSFV  豬瘟病毒抗體規(guī)格: 0.2ml

RELN/Reelin  絡(luò)絲蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

RhoA  RhoA抗體規(guī)格: 0.1ml

RAB40A  RAS基因家族蛋白R(shí)AB40A抗體規(guī)格: 0.2ml

YB1  y-盒結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml

ZNF300  鋅指蛋白300抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-human IgA  兔抗人免疫球蛋白A規(guī)格: 0.2ml

Dog IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體規(guī)格: 0.1ml

ATXN7L3B  共濟(jì)失調(diào)7樣蛋白3B抗體規(guī)格: 0.2ml

C10orf132/GOLGA7B  10號(hào)染色體開放閱讀框132抗體規(guī)格: 0.2ml 4-咪唑英文名稱:Imidazole4-piperidineCAS號(hào):147081-85-4分子式:151.21分子量:C8H13N3

2,4,5-三氯甲英文名稱:2,4,5-threeCAS號(hào):6639-30-1分子式:195.47分子量:C7H5Cl3

6-溴-4-羥喹啉英文名稱:6--4-hydroxygroupCAS號(hào):145369-94-4分子式:224.05分子量:C9H6BrNO

1-甲咪唑英文名稱:1-methylgroupCAS號(hào):616-47-7分子式:82.1分子量:C4H6N2

丙酸鉀英文名稱:PotassiumpropionateCAS號(hào):327-62-8分子式:112.17分子量:C3H5KO2

NBD-CO-Hz英文名稱:NBD公司赫茲CAS號(hào):221263-97-4分子式:266.22分子量:C9H10N6O4

三正已鋁英文名稱:HavealuminumtriCAS號(hào):1116-73-0分子式:282.48分子量:C18H39Al

1-甲-4-(三丁錫)-1H-吡唑英文名稱:1-methyl-4-(threebutyltin)-1H-pyrazoleCAS號(hào):179055-21-1分子式:371.14868分子量:C16H32N2Sn

N-乙-N-(3-磺)芐胺分子式:291分子量:C15H17NO3S英文名稱:N-ethyl-N-(3-sulfonicacid)benzylanilineCAS號(hào):101-11-1

3-羥吡英文名稱:3-hydroxypyridineCAS號(hào):109-00-2分子式:95.1分子量:C5H5NO

2-氟-6-硝甲英文名稱:2--6-nitrotolueneCAS號(hào):769-10-8分子式:155.13分子量:C7H6FNO2

3-氟-N-氧吡英文名稱:3--N-oxidationCAS號(hào):695-37-4分子式:113.09分子量:C5H4FNO

4--3-硝三氟甲英文名稱:4-amino-3-nitrothreefCAS號(hào):400-98-6分子式:分子量:

1,1'-二庚-4,4'-二溴聯(lián)吡鎓英文名稱:1,1'-two-4,4'-heptylbromidewithpyridiniumCAS號(hào):6159/5/3分子式:514.39分子量:C24H38Br2N2

1-溴-3,5-二巰英文名稱:1--3,5-twomercaptobromideCAS號(hào):1219501-75-3分子式:221.13分子量:C6H5BrS2

2-丁-6-吡英文名稱:2-butyl-6-phenylpyridineCAS號(hào):60272-71-1分子式:211.3分子量:C15H17N

2,2',3,3'-四羥-1,1'-聯(lián)萘英文名稱:2,2',3,3'-fourhydroxy-1,1'-CAS號(hào):61601-94-3分子式:318.32分子量:C20H14O4

1-羥-2,2,4,5,5-五甲-3-咪唑啉-3-氧物英文名稱:1--2,2,4,5,5--3--3-fivehydroxymethylimidazolineoxideCAS號(hào):18796-02-6分子式:172.23分子量:C8H16N2O2

小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法3-甲-4-碘吡唑英文名稱:3-methyl-4-CAS號(hào):15802-75-2分子式:208分子量:C4H5IN2

[1,3-雙(2,6-二異丙)咪唑-2-甲叉](1,3-二-1,3-丙二酮)銅英文名稱:【3雙(2,6-二異丙)咪唑-2-甲叉](1,3-二-1,3-丙二酮)銅CAS號(hào):920739-11-3分子式:675.4分子量:C42H47CuN2O2

2,7-二溴-9-(9-十七烷)咔唑英文名稱:2,7--9-(9-dibromoseventeenalkylcarbazole)CAS號(hào):955964-73-5分子式:563.46分子量:C29H41Br2N

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