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小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

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品       牌R&D/美國

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-03-15 14:16:05瀏覽次數(shù):175次

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用途:本試劑盒僅供科研使用,,定量檢測(cè)細(xì)胞液,、體液、組織,、血清,、血漿等標(biāo)本小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法含量。

小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱:Mouse 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。 
英文名稱:Mouse 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit 
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷,。
標(biāo)本:血清,、血漿、細(xì)胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水,、組織等,。
種屬:人、大鼠,、小鼠,、兔子、豬,、犬,、猴,、馬、牛,、羊,、雞、鴨,、魚等,。
小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器,、吸頭,、蒸餾水或去離子水,,濾紙,。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集,、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,,通過反復(fù)凍融,,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,,離心取上清液檢測(cè),。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測(cè)。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,,以1000×g離心15分鐘,收集上 清,。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,,稱取重量0.5mg,,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè),。
7. 樣品中不能含有NaN3,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),,應(yīng)將其分裝,,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(個(gè)濃度),、空白孔、待測(cè)樣品組,。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外),。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí),。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,,用吸水紙*拍干,。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A  50ul 后,再加入顯色劑 B  50ul,。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),,要控制加樣速度,,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行,。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,,如樣品濃度過高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),,如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,,可要求調(diào)換,,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食,、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

A172(人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠畸胎瘤細(xì)胞英文名稱:P19

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

SY5Y/神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株國產(chǎn)

黑木耳 Auricularia auricula

大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

KG-1(人急性骨髓性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus

人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞 Human

佛羅里達(dá)側(cè)耳 Pleurotus florida

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

泡盛曲霉 Aspergillus awamori

HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系

大豆慢生根瘤菌

木生條孢牛肝菌 Bolelus emodensis

枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis

金色產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces aureochromogenes

Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)規(guī)格:1000次

香菇 Lentinula edodes

無花果曲霉 Aspergillus ficuum

新生兒表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人髓性紅白血病細(xì)胞英文名稱:KG-1

Romas(人淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

NCI-H838(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion抗生素S 7481F1,, CyclosporineCyclosporine A

2-[(1,,2-Dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidene)methyl]-4-meth yl-1H-pyrrole-3-propanoic acidSU-5402

1-tert-Butyl-3-(4-chlorophenyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-4-aminePP2

LMB,; Elactocin,; Mantuamycin; CI-940,; CL-1957A,; PD-114720; ATS 1287BLeptomycin B

(Z)-4-(5-(3,,4-Dimethoxybenzylidene)-4-oxo-2-thioxothiazolidin-3-yl)butanoic acidCRT Inhibitor,, iCRT5

5-Methylisoxazole-4-(4-trifluoromethylcarboxanilide), N-(4-Trifluoromethylphenyl)-5-methylisoxazol-4-carboxamide,; HWA486,,Leflunomide

Biotinyl-Ala-Ser-Thr-DL-Asp-Fluoromethylketone,; Biotinyl-ASTD-FluoromethylketoneBiotinyl-ASTD-FMK

5-Rhapontigenin

H-Val-Pro-Leu-OHDiprotin B

8-Hydroxy-5-quinolinecarboxylic acid,; 8-Hydroxy-5-quinolinecarboxylic acidIOX1

2-Amino-7-(1-methylethyl)-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3-b]pyridine-3-carboxylic acid ,; AA 673,; Amoxanox,, CHX 3673Amlexanox

2-Methoxyethyl 1,4,,5,,6,7,,8-hexahydro-4-(3-hydroxyphenyl)-7-(-(2-methoxyphenyl)-2-methyl-5-oxo-3-quinolinecarboxylateHPI-1

D-(Ampicillin sodium

小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法((1S,,2S,4R)-4-(4-(((S)-2,,3-dihydro-1H-inden-1-yl)amino)-7H-pyrrolo[2,,3-d]pyrimidin-7-yl)-2-hydroxycyclopentylmethyl sulfamateMLN-4924

N2-[(2S)-2-(3,5-Difluorophenyl)-2-hydroxyethanoyl]-N1-[(7S)-5-methyl-6-oxo-6,,7-dihydro-5H-dibenzo[b,,d]azepin-7-yl]-L-alaninamide; LSN-411575LY-411575

N,,N’-(Methylenedi-4,,1-phenylene)bis-acetamide, N,N’-(Methylenedi-4,,1-phenylene)diacetamide,, NSC 12407FH1 (BRD-K4477)

BSA Control for Age-BSABSA Control for Age-BSA

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