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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>elisa試劑盒>> 小鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒實驗方法
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產(chǎn)品型號
品 牌R&D/美國
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2017-03-15 13:58:23瀏覽次數(shù):247次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)小鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒實驗方法 英文名稱:Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,,特異性強,,重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換,。
英文名稱:Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷,。
標本:血清,、血漿、細胞上清液,、尿液、體液,、灌洗液,、腦脊髓、心房水,、胸房水,、組織等。
種屬:人,、大鼠,、小鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛、羊,、雞,、鴨、魚等,。
小鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預(yù)熱30分鐘),,微量加液器、吸頭,、蒸餾水或去離子水,,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒實驗方法樣品收集,、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份,。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
2. 細胞:用PBS反復(fù)洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,,通過反復(fù)凍融,,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或 者細胞超聲粉碎,,離心取上清液檢測,。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,,以1000×g離心15分鐘,收集上 清,。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
6. 組織標本:切取組織標本,,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,,應(yīng)將其分裝,,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
小鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒實驗方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標準 品組(6 個濃度),、空白孔、待測樣品組,。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,,建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水,;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本,。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外),。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,,靜置 15-30s,,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干,。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時,,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,,從而影響 實驗的準確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行,。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進行稀釋,,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),,如果對本試劑盒有任何疑問,,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,,可要求調(diào)換,,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒實驗方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗,。
2. 實驗中不要進食,、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
大鼠表皮角化細胞*培養(yǎng)基100mL
蘇云金芽胞桿菌亞毒亞種 Bacillus thuringiensis subsp. subtoxicus
米根霉 Rhizopus oryzae
大鼠腸巨噬細胞*培養(yǎng)基100mL
SP Mouse HRP Kit(DAB)/鼠Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml,、18ml國產(chǎn)
人胰腺星狀細胞*培養(yǎng)基100mL
NCTC 1469(小鼠正常肝細胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
人小氣道上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
少孢根霉
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.
金龜子綠僵菌 Metarhizium anisopliae
檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum
中分子量單一蛋白Marker(35 kD)50次國產(chǎn)
白黃鏈霉菌 Streptomyces alboflavus
TE-10(人食管細胞)5×106cells/瓶×2
戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceus
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小鼠腸動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠食管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
CW-2(人結(jié)腸細胞)5×106cells/瓶×2
WTRL1(大鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2
梭形芽孢桿菌 Bacillus fusiformis
5637(人膀胱細胞)5×106cells/瓶×2
黑曲霉 Aspergillus niger
人椎間盤髓核細胞*培養(yǎng)基100mL
節(jié)桿菌 Arthrobacter sp. Eicosapentaenoic Acid methyl ester (100 mg)5Z,8Z,,11Z,,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid,, methyl ester,; EPA methyl ester; Eicosapentaenoic Acid methyl ester
Linoleoyl Ethanolamide-d4 (100 ug)N-(2-hydroxyethyl-1,,1,,2,,2-d4)-9Z,12Z-octadecadienamide,; Linoleoyl Ethanolamide-d4
Tafluprost ethyl amide (5 mg)N-ethyl-9α,,11α-dihydroxy-15,15-difluoro-16-phenoxy-17,,18,,19,20-tetranor-prosta-5Z,,13E-dien-1-amide,; Tafluprost ethyl amide
JWH 073 2’-naphthyl-N-(2-methylpropyl) isomer (10 mg)(1-isobutyl-1H-indol-3-yl)(naphthalen-2-yl)methanone; JWH 073 2’-naphthyl-N-(2-methylpropyl) isomer
JWH 081 6-methoxynaphthyl isomer (1 mg)(6-methoxy-1-naphthalenyl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)-methanone,; JWH 166,; JWH 081 6-methoxynaphthyl isomer
JWH 072 (25 mg)1-naphthalenyl(1-propyl-1H-indol-3-yl)-methanone; JWH 072
Linoleic Acid (peroxide free) (250 mg)9Z,,12Z-octadecadienoic acid,; fairic Acid; Linoleic Acid (peroxide free)
9(E),,11(E)-Conjugated Linoleic Acid (10 mg)9E,,11E-octadecadienoic acid; 9E,,11E-CLA|Isolinoleic Acid|Mangold’s acid,; 9(E),11(E)-Conjugated Linoleic Acid
Ro 67-4853 (1 mg)N-(9H-xanthen-9-ylcarbonyl)-butyl ester-carbamic acid,; Ro 67-4853
bpV(phen) (potassium hydrate) (25 mg)(PB-7-23-111’1’3)-oxodiperoxy(1,,10-phenanthroline-k/V1,k/V10)-vanadate(1-),, potassium trihydrate; Potassium Bisperoxo(1,,10-phenanthroline) oxovanadate (V)|Bisperoxovanadium(phen),; bpV(phen) (potassium hydrate)
1-(3-Chlorophenyl) piperazine (hydrochloride) (50 mg)1-(3-chlorophenyl)-piperazine, monohydrochloride,; mCPP|meta-Chlorophenyl piperazine,; 1-(3-Chlorophenyl) piperazine (hydrochloride)
小鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)elisa試劑盒實驗方法JWH 073 6-methoxyindole analog (5 mg)(1-butyl-6-methoxy-1H-indol-3-yl)(naphthalen-1-yl)methanone; JWH 073 6-methoxyindole analog
Idarubicin (hydrochloride) (10 mg)(7S,,9S)-9-acetyl-7-[(3-amino-2,,3,6-trideoxy-α-L-lyxo-hexopyranosyl)oxy]-7,,8,,9,,10-tetrahydro-6,9,,11-trihydroxy-5,,12-naphthacenedione, monohydrochloride,; 4-Demethoxydaunorubicin|4-DMD|NSC 256439,; Idarubicin (hydrochloride)
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