詳細(xì)介紹
小鼠α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Mouse Interferon α,IFN-α ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,,操作簡(jiǎn)便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。
英文名稱:Mouse Interferon α,IFN-α ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷,。
標(biāo)本:血清,、血漿、細(xì)胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水、組織等,。
種屬:人,、大鼠、小鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛,、羊,、雞、鴨,、魚等,。
小鼠α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器,、吸頭,、蒸餾水或去離子水,濾紙,。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用,。
小鼠α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無菌管收集細(xì)胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè),。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè),。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清,。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,,稱取重量0.5mg,,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè),。
7. 樣品中不能含有NaN3,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),,應(yīng)將其分裝,,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
小鼠α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度),、空白孔,、待測(cè)樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,,保證準(zhǔn)確性,,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水,;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外),。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí),。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,,靜置 15-30s,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,,用吸水紙*拍干,。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,再加入顯色劑 B 液 50ul,。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值,。
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),,要控制加樣速度,,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,,如樣品濃度過高,,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,,可和所購經(jīng)銷商,, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
小鼠α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液。一旦接觸到這些液體,,請(qǐng)盡快用水沖洗,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱:Daudi
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
HeLa全細(xì)胞裂解液100μg100μg
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
小鼠腮腺細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
人腎皮層上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
嬰兒雙歧桿菌 Bifidobacterium infantis
運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌 Zymomonas mobilis
紅絨蓋牛肝菌 Xerocomus chrysenteron
特異青霉(點(diǎn)青霉) Penicillium notatum
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
凍膠假絲酵母 Candida gelida
MCF-7(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
雅致放射毛霉 Actinomucor elegans
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
腎英文名稱:A498
MGC80-3(MGC-803)人胃細(xì)胞 Human
香菇屬 Lentinula sp.
Poly-D-lysine溶液規(guī)格:2mggersion
KM3, 人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞
威爾酵母 Saccharomyces willianus
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis BIM5078 (5 mg)1-[(2-chloro-5-nitrophenyl)sulfonyl]-2-methyl-1H-benzimidazole; BIM5078
Prostaglandin D3 (50 ug)9,。alpha,。,15S-dihydroxy-11-oxo-prosta-5Z,,13E,17Z-trien-1-oic acid,; PGD3,; Prostaglandin D3
2-amino-5-methyl-4-phenyl Thiazole (1 g)5-methyl-4-phenyl-2-thiazolamine; NSC 54435,; 2-amino-5-methyl-4-phenyl Thiazole
Anacardic Acid (1 mg)2-hydroxy-6-pentadecyl-benzoic acid,; 6-pentadecyl Salicylic Acid; Anacardic Acid
Pimelic Diphenylamide 106 (1 mg)N1-(2-aminophenyl)-N7-(4-methylphenyl)-heptanediamide,; TC-H 106|Histone Deacetylase Inhibitor VII,; Pimelic Diphenylamide 106
MS-275 (5 mg)N-[[4-[[(2-aminophenyl)amino]carbonyl]phenyl]methyl]-3-pyridinylmethyl ester, carbamic acid,; SNDX 275|Entinostat,; MS-275
ST638 (25 mg)2-cyano-3-[3-ethoxy-4-hydroxy-5-[(5-phenylthio)methyl]phenyl]-2-propenamide; ST638
Celastramycin A (5 mg)(3-chloro-5-hexyl-2,,6-dihydroxyphenyl)(4,,5-dichloro-1H-pyrrol-3-yl)-methanone; Celastramycin A
Salidroside (10 mg)2-(4-hydroxyphenyl)ethyl-β-D-glucopyranoside,; Rhodioloside,; Salidroside
Butaprost (10 mg)9-oxo-11。alpha,。,,16S-dihydroxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid, methyl ester,; 15-deoxy-16S-hydroxy-17-cyclobutyl PGE1 methyl ester|TR 4979,; Butaprost
JWH 116 (10 mg)(2-ethyl-1-pentyl-1H-indol-3-yl)-1-naphthalenyl-methanone,; JWH 116
15(R)-15-methyl Prostaglandin E2 (1 mg)9-oxo-11。alpha,。,,15R-dihydroxy-15-methyl-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid,; Arbaprostil|15(R)-15-methyl PGE2,; 15(R)-15-methyl Prostaglandin E2
小鼠α干擾素(IFN-α)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 Prostaglandin F2α methyl ester (10 mg)9。alpha,。,,11。alpha,。,,15S-trihydroxy-prosta-v5Z,13E-dien-1-oic acid,, methyl ester,; PGF2α methyl ester; Prostaglandin F2α methyl ester
11β-Prostaglandin F2α Ethanolamide (50 mg)N-(2-hydroxyethyl)-9,。alpha,。,11,。beta,。,15S-trihydroxy-prosta-5Z,,13E-dien-1-amide,; 11β-PGF2α-EA|11-epi PGF2α-EA; 11β-Prostaglandin F2α Ethanolamide