詳細介紹
小鼠雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法 英文名稱:Mouse Estradiol receptor,ER ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,,特異性強,重復性好的實驗方法,。其試劑穩(wěn)定,、易保存,操作簡便,。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。
英文名稱:Mouse Estradiol receptor,ER ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,,不得用于臨床診斷,。
標本:血清、血漿、細胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓、心房水,、胸房水,、組織等。
種屬:人,、大鼠,、小鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛、羊,、雞,、鴨、魚等,。
小鼠雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘),,微量加液器、吸頭,、蒸餾水或去離子水,,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,,如果樣品量不夠或者不確定,,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用,。
小鼠雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法樣品收集,、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,,通過反復凍融,,使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,或 者細胞超聲粉碎,,離心取上清液檢測,。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測。
4. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,,以1000×g離心15分鐘,收集上 清,。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
6. 組織標本:切取組織標本,,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,,應將其分裝,-70 ℃保存,,避免反復冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心,。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
小鼠雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設標準 品組(6 個濃度),、空白孔、待測樣品組,。 注:為減少實驗誤差,,保證準確性,建議設置復孔,。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水,;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本,。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外),。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,,靜置 15-30s,,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干,。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應 10-15 分鐘,,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復性,。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行,。
4. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,。
5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,,計算結(jié)果時乘以相應的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),,如果對本試劑盒有任何疑問,,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導致試劑盒失效,,可要求調(diào)換,,但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗,。
2. 實驗中不要進食,、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
小鼠腎小球內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL
A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2
WM35, 人黑色素瘤細胞
粘質(zhì)沙雷氏菌 Serratia marcescens
3T3-L1(小鼠胚胎成纖維細胞)5×106cells/瓶×2
鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
人滑膜細胞*培養(yǎng)基100mL
費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii
嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia
地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
大鼠骨骼肌細胞*培養(yǎng)基100mL
大豆慢生根瘤菌
人卵巢成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
香菇 Lentinula edodes
香菇 Lentinula edodes
SDS-PAGE Loading Buffer (還原,,5x)10ml國產(chǎn)
Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)規(guī)格:10000次
rEPC,大鼠內(nèi)皮祖細胞-骨髓
大鼠前列腺上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
雅致放射毛霉 Actinomucor elegans
C2C12(小鼠成肌細胞)5×106cells/瓶×2
漆斑菌 Myrothecium sp.
人臍動脈內(nèi)皮細胞 Human
H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源)Pimelic Diphenylamide 106 (10 mg)N1-(2-aminophenyl)-N7-(4-methylphenyl)-heptanediamide,; TC-H 106|Histone Deacetylase Inhibitor VII,; Pimelic Diphenylamide 106
Cannabidiol dimethyl ether (1 mg)1,3-dimethoxy-2-[(1R,,6R)-3-methyl-6-(1-methylethenyl)-2-cyclohexen-1-yl]-5-pentyl-benzene,; Cannabidiol-2’,6’-dimethyl ether|CBDD,; Cannabidiol dimethyl ether
ST638 (5 mg)2-cyano-3-[3-ethoxy-4-hydroxy-5-[(5-phenylthio)methyl]phenyl]-2-propenamide,; ST638
Oxalomalic Acid (sodium salt) (1 mg)3-carboxy-3-deoxy-2-pentulosaric acid, trisodium salt,; Oxalomalic Acid (sodium salt)
Salidroside (5 mg)2-(4-hydroxyphenyl)ethyl-β-D-glucopyranoside,; Rhodioloside; Salidroside
Butaprost (5 mg)9-oxo-11,。alpha,。,16S-dihydroxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid,, methyl ester,; 15-deoxy-16S-hydroxy-17-cyclobutyl PGE1 methyl ester|TR 4979; Butaprost
JWH 116 (5 mg)(2-ethyl-1-pentyl-1H-indol-3-yl)-1-naphthalenyl-methanone,; JWH 116
15(R)-15-methyl Prostaglandin E2 (10 mg)9-oxo-11,。alpha,。,15R-dihydroxy-15-methyl-prosta-5Z,,13E-dien-1-oic acid,; Arbaprostil|15(R)-15-methyl PGE2; 15(R)-15-methyl Prostaglandin E2
Prostaglandin F2α methyl ester (5 mg)9,。alpha,。,11,。alpha,。,15S-trihydroxy-prosta-5Z,,13E-dien-1-oic acid,, methyl ester; PGF2α methyl ester,; Prostaglandin F2α methyl ester
2,,3-dinor-11β-Prostaglandin F2α (25 ug)9α,11β,,15S-trihydroxy-2,,3-dinor-prosta-5Z,,13E-dien-1-oic acid,; 2,3-dinor-11β-PGF2α|2,,3-dinor-11-epi PGF2α,; 2,3-dinor-11β-Prostaglandin F2α
小鼠雌二醇受體(ER)elisa試劑盒實驗方法15(S)-Latanoprost (1 mg)9,。alpha,。,11,。alpha,。,15S-trihydroxy-17-phenyl-18,,19,,20-trinor-prost-5Z-en-1-oic acid, isopropyl ester,; 15-epi Latanoprost,; 15(S)-Latanoprost
CAY10572 (50 mg)1,5,,6,,7-tetrahydro-2-(4-pyridinyl)-4H-pyrrolo[3,,2-c]pyridin-4-one; PHA 767491,; CAY10572