小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Mouse Complement 3,C3 ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,，特異性強(qiáng),，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,，操作簡便,。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。 
英文名稱：Mouse Complement 3,C3 ELISA Kit  
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實(shí)驗(yàn)試劑,，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清,、血漿,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
種屬：人,、大鼠、小鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛,、羊,、雞、鴨,、魚等,。
小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器,、吸頭,、蒸餾水或去離子水，濾紙,。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,，靜置1小時(shí)備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）,。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用,。
小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集,、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,，通過反復(fù)凍融,，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,，或 者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測,。
3. 血清：在室溫下,，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘,，取上清待測,。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后,，以1000×g離心15分鐘,，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水,、腦脊液,，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本,，稱取重量0.5mg,，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器,，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測,，應(yīng)將其分裝,，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心,。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1. 取出試劑盒,，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板,，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）,、空白孔,、待測樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差,，保證準(zhǔn)確性,，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水,；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）,。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí),。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔,，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次,，用吸水紙*拍干,。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul,。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí),，要控制加樣速度,，避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行,。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深,，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高,，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，試用幾個(gè)標(biāo)本）,，如果對(duì)本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商,， 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,，可要求調(diào)換,，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食,、抽煙或使用化妝品,。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

杜鵑盤多毛孢霉 Pestalotia rhododendri

Hs 746T(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

葡萄球菌屬 Staphylococcus sp.

黑根霉=匍枝根霉

HEC-1A, 人子宮內(nèi)膜細(xì)胞系 Human

 細(xì)胞名稱 種屬

大麗輪枝孢 Verticillium dahliae

NAMALWA(人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

大鼠淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

異酒香酵母 Brettanomyces anomalus

灰色困難鏈霉菌 Streptomyces griseodifficilis

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 Yersinia enterocolitica

三寶壟根霉 Rhizopus semaranzensis

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

銅綠假單胞菌 Pseudomonas aeruginosa

PC-12(高分化),，PC12,，大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株(高分化) Rattus

炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius

嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus 20-carboxy Leukotriene B4 （25 ug）5S，12R-dihydroxy-6Z,，8E,，10E，14Z-eicosatetraene-1,，20-dioic acid,； 20-carboxy LTB4； 20-carboxy Leukotriene B4

12（S）-HEPE （25 ug）12S-hydroxy-5Z,，8Z,，10E，14Z,，17Z-eicosapentaenoic acid,； 12（S）-HEPE

5（S）-HETrE （50 ug）5S-hydroxy-6E，8Z,，11Z-eicosatrienoic acid,； 5（S）-HETrE

Potassium Hydroxide （1 ea）Potassium Hydroxide

Prostaglandin D2 Express AChE Tracer （500 dtn）Prostaglandin D2 Express AChE Tracer

13（S）-HpOTrE （500 ug）13S-hydroperoxy-9Z,，11E，15Z-octadecatrienoic acid,； 13（S）-HpOTrE

Maturation-Inducing Steroid （salmonid） AChE Tracer （500 dtn）MIS （salmonid） AChE Tracer|17,。alpha。,，20,。beta。-dihydroxy-4-Pregnen-3-one AChE Tracer,； Maturation-Inducing Steroid （salmonid） AChE Tracer

Tris-EDTA Stock Solution （10X,， pH 7。4） （500 mL）TE Buffer,； Tris-EDTA Stock Solution （10X,， pH 7。4）

Methylcarbamyl PAF C-16 （5 mg）1-O-hexadecyl-2-O-（N-methylcarbamoyl）-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine,； Methylcarbamyl PAF C-16

C-8 Ceramide-1-phosphate （25 mg）N-octanoylsphingosine-1-phosphate,； C-8 Ceramide-1-phosphate

COX-FA Fluorometric Substrate （1 ea）Fluorometric Substrate； COX-FA Fluorometric Substrate

Latanoprost Lactone Diol （50 mg）（3aR,，4R,，5R，6aS）-hexahydro-5-hydroxy-4-[（3R）-3-hydroxy-5-phenylpentyl]-2H-cyclopenta[b]furan-2-one,； Latanoprost Lactone Diol

小鼠補(bǔ)體蛋白3(C3)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法CAY10404 （1 mg）3-[4-（methylsulfonyl）phenyl]-4-phenyl-5-（trifluoromethyl）-isoxazole,； CAY10404

Furegrelate （sodium salt） （5 mg）5-（3-pyridinylmethyl）-2-benzofurancarboxylic acid， sodium salt,； U-63557A,； Furegrelate （sodium salt）

BAY-u9773 （100 ug）4-[[（1R，2E,，4E,，6Z，9Z）-1-[（1S）-4-carboxy-1-hydroxybutyl]-2,，4,，6，9-pentadecatetraenyl]thio]-benzoic acid,； BAY-u9773