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小鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱:Mouse Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,,重復性好的實驗方法,。其試劑穩(wěn)定、易保存,,操作簡便,。凡購買本公司試劑盒非人為質量問題,收貨后十五個工作日內包退換,。
英文名稱:Mouse Pulmonary surfatcant-associated protein A,SP-A ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,,不得用于臨床診斷。
標本:血清,、血漿,、細胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
種屬:人,、大鼠,、小鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛、羊,、雞,、鴨、魚等,。
小鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘),,微量加液器、吸頭,、蒸餾水或去離子水,,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,,如果樣品量不夠或者不確定,,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用,。
小鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟樣品收集,、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,,調整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,,或 者細胞超聲粉碎,,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清,。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,,分泌物等,。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,,加入500ul 的PBS,,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,,-70 ℃保存,,避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀,,應再次離心,。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
小鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數,,把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準 品組(6 個濃度),、空白孔,、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,保證準確性,,建議設置復孔,。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水,;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本,。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外),。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,,放入濕盒內于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,,靜置 15-30s,,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干,。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應 10-15 分鐘,,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復性,。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行,。
4. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,。
5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,,應對樣品進行稀釋,,計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,,試用幾個標本),,如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商,, 如果因運輸過程導致試劑盒失效,,可要求調換,,但概不承擔產品本身以外的任何損失。
小鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗,。
2. 實驗中不要進食,、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
根瘤菌 Rhizobium sp.
膠韌革菌 Gloeostereum incarnatum
人支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
珊瑚色諾卡氏菌 Nocardia coralline
果香地霉
TE-11(人食管細胞)5×106cells/瓶×2
A-427(人肺細胞)5×106cells/瓶×2
異常漢遜酵母 Hansenula anomala
小鼠胚胎成纖維細胞英文名稱:3T3A31
Caki-2(人腎透細胞細胞)5×106cells/瓶×2
爪哇正青霉 Eupenicillium javanicum
灰色產色鏈霉菌 Streptomyces griseochromogenes
NCI-H295R(人腎上腺皮質腺細胞)5×106cells/瓶×2
狀絲孢酵母 Trichosporon capitatum
出芽短梗霉=出芽茁霉 Aureobasidium pullulans
MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 Mouse
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
尖孢鐮刀菌棉花專化型 Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
Caov-3(人突狀卵巢腺細胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
鏈球菌 Lactococcus lactis
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
紅曲霉 Monascus anka
猴菌
樹狀假絲酵母 Candida cerevisiae
香菇 Lentinula edodes
木霉Carboxytetramethylrhodamine,, succinimidyl ester] Validated for labeling oligos
臺盼紫 0,。1M水溶液Trypan Purple 0。1 M aqueous solution
酪蛋白,,TAMRA標記Casein,, TAMRA-conjugated
鈣離子熒光探針Rhod-5N,三鉀鹽Rhod-5N,, tripotassium salt
6-HEX氨基磷酯[5’-六氯熒光素氨基磷酯]6-HEX phosphoramidite [5’-Hexachlorofluorescein phosphoramidite]
iFluor 647-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/mliFluor 647-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Cyanine 3疊氮化物 [相當于Cy3疊氮化物]Cyanine 3 azide [equivalent to Cy3 azide]
ICG-Sulfo-EG8-OSuICG-Sulfo-EG8-OSu
2C-N (5 mg)2,,5-dimethoxy-4-nitro-benzeneethanamine; 2,,5-Dimethoxy-4-nitrophenethylamine,; 2C-N
BI6015 (5 mg)2-methyl-1-[(2-methyl-5-nitrophenyl)sulfonyl]-1H-benzimidazole; BI6015
Prostaglandin D3 (1 mg)9,。alpha,。,15S-dihydroxy-11-oxo-prosta-5Z,,13E,,17Z-trien-1-oic acid; PGD3,; Prostaglandin D3
N-3-oxo-tetradecanoyl-L-Homoserine lactone (25 mg)3-oxo-N-[(3S)-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-tetradec*,; 3-oxo-C14-HSL|N-3-oxo-myristoyl-L-Homoserine lactone; N-3-oxo-tetradecanoyl-L-Homoserine lactone
AGK2 (1 mg)2-cyano-3-[5-(2,,5-dichlorophenyl)-2-furanyl]-N-5-quinolinyl-2-propenamide,; AGK2
Pimelic Diphenylamide 106 (5 mg)N1-(2-aminophenyl)-N7-(4-methylphenyl)-heptanediamide; TC-H 106|Histone Deacetylase Inhibitor VII,; Pimelic Diphenylamide 106
Cannabidiol dimethyl ether (5 mg)1,,3-dimethoxy-2-[(1R,6R)-3-methyl-6-(1-methylethenyl)-2-cyclohexen-1-yl]-5-pentyl-benzene,; Cannabidiol-2’,,6’-dimethyl ether|CBDD,; Cannabidiol dimethyl ether
SU 6656 (10 mg)2,3-dihydro-N,,N-dimethyl-2-oxo-3-[(4,,5,6,,7-tetrahydro-1H-indol-2-yl)methylene]-1H-indole-5-sulfonamide,; SU 6656
Oxalomalic Acid (sodium salt) (25 mg)3-carboxy-3-deoxy-2-pentulosaric acid, trisodium salt,; Oxalomalic Acid (sodium salt)
小鼠肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)elisa試劑盒操作步驟13,,14-dihydro-15(R)-Prostaglandin E1 (1 mg)9-oxo-11。alpha,。,,15R-dihydroxy-prostan-1-oic acid; 13,,14-dihydro-15(R)-PGE1,; 13,14-dihydro-15(R)-Prostaglandin E1
CAY10408 (10 mg)9-oxo-11,。alpha,。,16R-dihydroxy-17-cyclobutyl-5Z,,13E-dien-1-oic acid,; CAY10408
JWH 149 (10 mg)(4-methyl-1-naphthalenyl)(2-methyl-1-pentyl-1H-indol-3-yl)-methanone; JWH 149
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