小鼠泛素蛋白(Ub)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱：Mouse Ubiquitin,Ub ELISA Kit       檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng),，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法,。其試劑穩(wěn)定、易保存,，操作簡便,。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。 
英文名稱：Mouse Ubiquitin,Ub ELISA Kit  
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途：科研與實(shí)驗(yàn)試劑,，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清,、血漿,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
種屬：人,、大鼠、小鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛,、羊、雞,、鴨,、魚等,。
小鼠泛素蛋白(Ub)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器,、吸頭,、蒸餾水或去離子水，濾紙,。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,，靜置1小時(shí)備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）,。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用,。
小鼠泛素蛋白(Ub)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無菌管收集細(xì)胞上清液,，以1000×g離心15分鐘，收集上清,。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右，通過反復(fù)凍融,，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,，或 者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè),。
3. 血清：在室溫下,，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘,，取上清待測(cè),。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后,，以1000×g離心15分鐘,，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水,、腦脊液,，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本,，稱取重量0.5mg,，加入500ul 的PBS,，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,，以2000-3000 rmp離心20 分鐘,，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝,，-70 ℃保存,，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心,。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,，檢測(cè)前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
小鼠泛素蛋白(Ub)elisa試劑盒操作步驟操作步驟：
1. 取出試劑盒,，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板,，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）,、空白孔,、待測(cè)樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差,，保證準(zhǔn)確性,，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水,；其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）,。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí),。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s,，充分清洗酶標(biāo)板 5 次,，用吸水紙*拍干,。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul,。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí),，要控制加樣速度,，避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,，如果顏色較深,，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,，如樣品濃度過高,，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,，可和所購經(jīng)銷商,， 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換,，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
小鼠泛素蛋白(Ub)elisa試劑盒操作步驟安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,，請(qǐng)盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食,、抽煙或使用化妝品,。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

泡盛曲霉 Aspergillus awamori

石蕊殺菌素鏈霉菌 Streptomyces litmocidini

293A (人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

野油菜黃單孢菌 Xanthomonas campestris

小雙孢菌 Microbispora sp.

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus

草酸青霉 Penicillium oxalicum

KiMA(人胚腎上皮細(xì)胞系)5×106cells/瓶×2

MCF-7（MCF7）（ATCC來源）, 人腺細(xì)胞

小鼠腎上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

小鼠腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

蘋果鏈格孢 Alternaria mali

芽胞菌 Bacillus sp.

總狀毛霉 Mucor racemosus

枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis

鏈霉菌 Streptomyces sp. Proscillaridin A （25 mg）（3β）-3-[（6-deoxy-α-L-mannopyranosyl）oxy]-14-hydroxy-bufa-4,，20,，22-trienolide； A-32686|NSC 7521|PSC-801； Proscillaridin A

1,，2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC （250 mg）1,，2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine； 1,，2-DSPC|Coatsome MC 8080|1,，2-Distearoyl-sn-glycero-3-Phosphocholine； 1,，2-Distearoyl-sn-glycero-3-PC

ML-030 （5 mg）3-（2,，5-dimethoxyphenyl）-6-（3，4-dimethoxyphenyl）-7H-1,，2,，4-triazolo[3，4-b][1,，3,，4]thiadiazine； CID-11757146,； ML-030

GSK 3787 （10 mg）4-chloro-N-[2-[[5-（trifluoromethyl）-2-pyridinyl]sulfonyl]ethyl]-benzamide,； GSK 3787

Cell-Based Assay Antimycin A （200 ul）Cell-Based Assay Antimycin A

CAY10679 （10 mg）1，1’-（1,，8-dioxo-1,，8-octanediyl）bis[glycyl-glycine； N,，N’-bis（glycyl-glycine）-hexane-1,，6-Dicarboxyamide； CAY10679

Lutein （5 mg）E 161b|FloraGLO|Xanthophyll,； （6’R）-β,ε-carotene-3R,3’R-diol

5-Bromoisoquinoline （5 g）5-bromo-isoquinoline

Epigenetics Screening Library （96-Well） （100 ul）Epigenetics Screening Library （96-Well）

（±）11-HEPE （250 ug）（±）-11-hydroxy-5Z,，8Z，12E,，14Z,，17Z-eicosapentaenoic acid； （±）11-HEPE

（±）5,，6-DHET （25 ug）（±）5,，6-dihydroxy-8Z，11Z,，14Z-eicosatrienoic acid,； （±）5，6-DiHETrE,； （±）5,，6-DHET

小鼠泛素蛋白(Ub)elisa試劑盒操作步驟MF63 （5 mg）2-

Yangonin （25 mg）4-methoxy-6-[（1E）-2-（4-methoxyphenyl）ethenyl]-2H-pyran-2-one

25N-NBOMe （hydrochloride） （5 mg）2,；C-N-NBOMe； 2-（2,5-dimethoxy-4-nitrophenyl）-N-（2-methoxybenzyl）ethanamine, monohydrochloride

Conduritol B epoxide （50 mg）CBE,； 1,2-anhydro-myo-inositol