詳細(xì)介紹
小鼠顆粒酶B(Gzms-B)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Mouse granzymes B,Gzms-B ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。
小鼠顆粒酶B(Gzms-B)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
小鼠顆粒酶B(Gzms-B)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,,效期內(nèi)使用,,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用,。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘,。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃,。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),,標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融,。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,,造成吸光度偏離的假像,。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,,請(qǐng)勿冷凍,,有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。
三,、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,,如微量移液器,,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,,按照1:100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,,充分混勻待用。)
小鼠顆粒酶B(Gzms-B)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),,每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔,、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰,、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl,。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置 30 秒后棄去,,如此 重復(fù) 5 次,拍干,。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3,。
8.洗滌:操作同 5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
人肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
黑曲霉 Aspergillus niger
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
V5 Tag IP/Co-IP Kit/V5標(biāo)簽免疫沉淀試劑盒25次試劑盒
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
慶豐鏈霉菌 Streptomyces qingfengmyceticus
青霉菌 Penicillium sp.
PC-3M(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
HNE2, 人鼻咽細(xì)胞系 Human
膠凍樣芽胞桿菌 Bacillus mucilaginosus
泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.
Lec1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Westrrn Blot Loading ControlsWestrrn Blot/內(nèi)參陽(yáng)性對(duì)照100μg100μg
釀酒酵母 Saccharomyces cereviaiae
293T/胚腎細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)
無(wú)花果曲霉 Aspergillus ficuum
人血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
醋酸鈣不動(dòng)桿菌 Acinetobacter calcoaceticus
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kenyae
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小鼠白血病細(xì)胞G-CSF依賴性英文名稱:NFS-60
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
委內(nèi)瑞拉鏈霉菌 Streptomyces venezuelae Prostaglandin Screening AChE Tracer (100 dtn)Prostaglandin Screening AChE Tracer
COX Inhibitor Screening Assay COX-2 (ovine) (1 ea)COX-2 (ovine),; COX Inhibitor Screening Assay COX-2 (ovine)
Transcription Factor p53 96-Well Strip Plate (1 ea)Transcription Factor p53 96-Well Strip Plate
Saline Sodium Phosphate EDTA Stock Solution (20X, pH 6,。5) (1 L)SSPE Buffer,; Saline Sodium Phosphate EDTA Stock Solution (20X, pH 6,。5)
PAF C-18 (10 mg)1-O-octadecyl-2-O-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine,; PAF C-18
Sphingosine-1-Phosphate (25 mg)2S-ami-(dihydrogen phosphate)-4E-octadecene-1,3R-diol,; S1P|Sphingosine-1-Phosphoric Acid,; Sphingosine-1-Phosphate
LSD1 Assay Horseradish Peroxidase (1 ea)Horseradish Peroxidase|Lysine-Specific Demethylase 1 Assay HRP; LSD1 Assay Horseradish Peroxidase
LSD Assay Buffer (10X) (5 ml)LSD Assay Buffer (10X)
LY83583 (1 mg)6-(phenylamino)-5,,8-quinolinedione,; LY83583
Aconitase Assay Buffer (10X) (1 ea)Assay Buffer (10X); Aconitase Assay Buffer (10X)
GW 9662 (5 mg)2-chloro-5-nitrobenzanilide,; GW 9662
小鼠顆粒酶B(Gzms-B)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法HET0016 (1 mg)N-(4-butyl-2-methylphenyl)-N’-hydroxy-methanimidamide,; N-hydroxy-N’-(4-n-butyl-2-methylphenyl)Formamidine; HET0016
CDDO (10 mg)2-cyano-3,,12-dioxo-oleana-1,,9(11)-dien-28-oic acid; Bardoxolone|RTA 401; CDDO
S-Nitroso-L-glutathione (50 mg)N-(N-L-,。gamma,。-glutamyl-S-nitroso-L-cysteinyl)-glycine; GSNO,; S-Nitroso-L-glutathione