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小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號

品       牌R&D/美國

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-03-15 12:49:45瀏覽次數(shù):212次

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用途:本試劑盒僅供科研使用,定量檢測細(xì)胞液、體液,、組織,、血清,、血漿等標(biāo)本小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟含量,。

小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱:Mouse glucocorticoid receptor,GR ELISA Kit      檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法,。其試劑穩(wěn)定、易保存,,操作簡便,。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換,。 
英文名稱:Mouse glucocorticoid receptor,GR ELISA Kit 
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清,、血漿,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
種屬:人,、大鼠、小鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛,、羊,、雞,、鴨、魚等,。
小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),,微量加液器、吸頭,、蒸餾水或去離子水,,濾紙,。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,,靜置1小時備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用,。
小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無菌管收集細(xì)胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測,。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測,。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進(jìn)行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),,把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(個濃度),、空白孔,、待測樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,,建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水,;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本,。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外),。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,,靜置 15-30s,,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干,。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A  50ul 后,,再加入顯色劑 B  50ul,。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時,,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行,。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個標(biāo)本),,如果對本試劑盒有任何疑問,,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,,可要求調(diào)換,,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

許旺酵母 Schwanniomyces occidentalis

菜豆根瘤菌 Rhizobium phaseoli

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

人腎透細(xì)胞皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞英文名稱:Caki

大豆慢生根瘤菌

Hs 578T(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

香菇 Lentinula edodes

人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

中性紅染色液(活細(xì)胞染色用)規(guī)格:100ml

小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

意大利青霉 Penicillium italicum

BT-474(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

成人表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

香菇 Lentinula edodes

酒假絲酵母 Candida kefyr 20-hydroxy Leukotriene B4 (50 ug)5S,12R,,20-trihydroxy-6Z,,8E,10E,,14Z-eicosatetraenoic acid,; 20-hydroxy LTB4,; 20-hydroxy Leukotriene B4

15(S)-HEPE (100 ug)15S-hydroxy-5Z,8Z,,11Z,,13E,17Z-eicosapentaenoic acid,; 15(S)-HEPE

8(S)-HETrE (100 ug)8S-hydroxy-9E,,11Z,14Z-eicosatrienoic acid,; 8(S)-HETrE

Phosphate Buffer (250 dtn)Phosphate Buffer

Prostaglandin Screening AChE Tracer (500 dtn)Prostaglandin Screening AChE Tracer

COX Inhibitor Screening Assay Heme (1 ea)Heme,; COX Inhibitor Screening Assay Heme

Transcription Factor p53 Positive Control (1 ea)Transcription Factor p53 Positive Control

Saline Sodium Phosphate EDTA Stock Solution (20X, pH 6,。5) (250 mL)SSPE Buffer,; Saline Sodium Phosphate EDTA Stock Solution (20X, pH 6,。5)

PAF C-18 (100 mg)1-O-octadecyl-2-O-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine,; PAF C-18

Sphingosine-1-Phosphate (5 mg)2S-ami-(dihydrogen phosphate)-4E-octadecene-1,3R-diol,; S1P|Sphingosine-1-Phosphoric Acid,; Sphingosine-1-Phosphate

LSD1 Assay Peptide (1 ea)LSD1 Peptide|Lysine-Specific Demethylase 1 Assay Peptide; LSD1 Assay Peptide

LSD Positive Control (100 uL)LSD Positive Control

LY83583 (10 mg)6-(phenylamino)-5,,8-quinolinedione,; LY83583

小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)elisa試劑盒操作步驟Aconitase Positive Control (1 ea)Aconitase Positive Control

GW 9662 (50 mg)2-chloro-5-nitrobenzanilide; GW 9662

HET0016 (10 mg)N-(4-butyl-2-methylphenyl)-N’-hydroxy-methanimidamide,; N-hydroxy-N’-(4-n-butyl-2-methylphenyl)Formamidine,; HET0016

CDDO (5 mg)2-cyano-3,12-dioxo-oleana-1,,9(11)-dien-28-oic acid,; Bardoxolone|RTA 401; CDDO

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