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小鼠鐵蛋白(FE)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-03-15 12:31:45瀏覽次數(shù):225次

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小鼠鐵蛋白(FE)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱:Mouse ferritin,FE ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。 
小鼠鐵蛋白(FE)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求 
1
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
2
.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。
小鼠鐵蛋白(FE)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑,,效期內(nèi)使用,,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用,。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘,。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,標(biāo)本可存放于28℃,。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,,避免反復(fù)凍融,。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,,否則將降低精確度,,造成吸光度偏離的假像,。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,,以便使孔中的液體充分混勻,。
8. 試劑盒保存于28℃,請(qǐng)勿冷凍,,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示,。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,,室溫放置至少30分鐘,。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,,吸頭,,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水119倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水14倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,,充分混勻待用,。)
小鼠鐵蛋白(FE)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔,、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔,、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰,、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照,、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,,然后再加待測(cè)樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,,拍干,。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外,。
7.溫育:操作同 3,。
8.洗滌:操作同 5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.
終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus

人肝星形細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

巨大芽胞桿菌 Bacillus megaterium

桿菌屬 Lactobacillus sp.

RTE(大鼠氣管上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Western Blot封閉液Ⅱ(奶粉,pH7.5)/Blocking Buffer(milk)100ml,、500ml100ml、500ml

MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元

293FT(人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

牛鏈球菌 Streptococcus bovis

人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

紅曲霉 Monascus anka

宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

胰酶細(xì)胞消化液規(guī)格:100ml

土曲霉 Aspergillus terreus

許旺酵母 Schwanniomyces occidentalis

吸水鏈霉菌應(yīng)城變種 Streptomyces hygroscopicus var. yingchengensis

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

小鼠肥大細(xì)胞細(xì)胞英文名稱:P815

大豆慢生根瘤菌

MuM-2C(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

蘇云金芽孢桿菌庫(kù)爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki

人腺腺細(xì)胞英文名稱:MDA-MB-415

結(jié)晶紫染色液規(guī)格:100ml Tetramethylrhod胺-dUTP 溶解于1 mM Tris緩沖液(pH 7,。5)Tetramethylrhodamine-dUTP 1 mM in Tris Buffer (pH 7,。5)

Cyanine 3。5馬來(lái)酰亞胺 [相當(dāng)于Cy3,。5馬來(lái)酰亞胺]Cyanine 3,。5 Maleimide [equivalent to Cy3。5 Maleimide]

Caliber Fluor 580Caliber Fluor 580

2C-T-4 (hydrochloride) (5 mg)2,,5-dimethoxy-4-[(1-methylethyl)thio]-benzeneethanamine,, monohydrochloride; 2,,5-dimethoxy-4-isopropylthiophenethylamine,; 2C-T-4 (hydrochloride)

AH 7921 (10 mg)3,4-dichloro-N-[[1-(dimethylamino)cyclohexyl]methyl]-benzamide,; AH 7921

2-methyl Benzamideoxime (500 mg)(Z)-N’-hydroxy-2-methylbenzimidamide,; 2-methyl Benzamideoxime

SB 203580 (10 mg)4-[4-(4-fluorophenyl)-2-[4-methylsulfinyl)phenyl]-1H-imidazol-5-yl]-pyridine; PB 203580|RWJ 64809,; SB 203580

CAY10603 (5 mg)N-[4-[3-[[[7-(hydroxyamino)-7-oxoheptyl]amino]carbonyl]-5-isoxazolyl]phenyl]-1,,1-dimethylethyl ester, carbamic acid,; CAY10603

(-)-CP 47,,497 (solution) (25 mg)2[(1S,3R)-3-hydroxycyclohexyl]-5-(2-methyloctan-2-yl)phenol,; (-)-CP 47,,497 (solution)

Itraconazole (100 mg)4-[4-[4-[4-[[2-(2,4-dichlorophenyl)-2-(1H-1,,2,,4-triazol-1-ylmethyl)-1,3-dioxolan-4-yl]methoxy]phenyl]-1-piperazinyl]phenyl]-2,4-dihydro-2-(1-methylpropyl)-3H-1,,2,,4-triazol-3-one; Itraconazole

SQ 22,,536 (50 mg)9-(tetrahydro-2-furanyl)-9H-purin-6-amine,; NSC 53339; SQ 22,,536

Apelin-36 (1 mg)Apelin-36

UNC0224 (5 mg)7-[3-(dimethylamino)propoxy]-2-(hexahydro-4-methyl-1H-1,,4-diazepin-1-yl)-6-methoxy-N-(1-methyl-4-piperidinyl)-4-quinazolinamine; UNC0224

小鼠鐵蛋白(FE)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 16,,16-dimethyl Prostaglandin E1 (5 mg)9-oxo-11,。alpha。,,15R-dihydroxy-16,,16-dimethyl-prost-13E-en-1-oic acid; 16,,16-dimethyl PGE1,; 16,16-dimethyl Prostaglandin E1

JWH 193 (25 mg)(4-methyl-1-naphthalenyl)[1-[2-(4-morpholinyl)ethyl]-1H-indol-3-yl]-methanone,; JWH 193

16,,16-dimethyl Prostaglandin E2 (10 mg)9-oxo-11。alpha,。,,15R-dihydroxy-16,16-dimethyl-prosta-5Z,,13E-dien-1-oic acid,; 16,16-dimethyl PGE2,; 16,,16-dimethyl Prostaglandin E2

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