小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Mouse Hexokinase,HK ELISA Kit      檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法,。其試劑穩(wěn)定,、易保存，操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。 
小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求 
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性,。
小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑,，效期內(nèi)使用,，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號(hào)的試劑不能混用,。
2． 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,。室溫放置至少30分鐘，
3． 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘,。
4． 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后，請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5． 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),，標(biāo)本可存放于2～8℃,。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn)，標(biāo)本-20℃保存,，避免反復(fù)凍融,。
6． 在反復(fù)清洗微孔板，并扣干微孔中的殘余液體,，否則將降低精確度,，造成吸光度偏離的假像。
7． 加樣完畢后,，應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,，以便使孔中的液體充分混勻。
8． 試劑盒保存于2～8℃,，請(qǐng)勿冷凍,，有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三,、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1．使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,，室溫放置至少30分鐘,。
2．準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器,，吸頭,，醫(yī)用蒸餾水等
3．濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4．濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5．用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品，按照1：100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,，充分混勻待用,。）
小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1.編號(hào)：將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔,、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔,、空白對(duì)照 1孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰,、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照,、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,，然后再加待測(cè)樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次,，拍干,。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外,。
7.溫育：操作同 3,。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl,，再加入顯色劑 B50µl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

人腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

桿菌屬 Lactobacillus sp.

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis

戴爾根霉

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

蘇云金芽胞桿菌達(dá)爾可他亞種 Bacillus thuringiensis subsp. dakota

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

COLO 205(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

白盤(pán)孢 Gloeosporium album

綠色木霉 Trichoderma viride

胰腺腺泡細(xì)胞英文名稱：MPC-83

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)5×106cells/瓶×2

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

人腺細(xì)胞英文名稱：Hs 578T

異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala

BE(2)-M17(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

CT26.WT(小鼠結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

中國(guó)臺(tái)灣根霉 Rhizopus formosensis

大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

黑曲霉 Aspergillus niger

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

假單胞菌 Pseudomonas sp.

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

桿菌屬 Lactobacillus sp. Norfluoxetine （5 mg）Desmethylfluoxetine； γ-[4-（trifluoromethyl）phenoxy]-benzenepropanamine

Alprenolol （hydrochloride） （25 mg）H 56/28； 1-[（1-methylethyl）amino]-3-[2-（2-propen-1-yl）phenoxy]-2-propanol, monohydrochloride

Corticosterone （500 mg）11β,21-DHP|11β,21-dihydroxy Progesterone|17-deoxy Cortisol|NSC 9705,； 11β,21-dihydroxy-pregn-4-ene-3,20-dione

Tris（4,7-diphenyl-1,10-phenanthroline）ruthenium II dichloride complex （5 mg）Ru（ddp）,； （OC-6-11）-tris（4,7-diphenyl-1,10-phenanthroline-κN1,κN10）-ruthenium（2+）, dichloride

LY411575 （1 mg）N-[（1S）-2-[[（7S）-6,7-dihydro-5-methyl-6-oxo-5H-dibenz[b,d]azepin-7-yl]amino]-1-methyl-2-oxoethyl]-3,5-difluoro-αS-hydroxy-benzeneacetamide

BIX02188 （25 mg）（3Z）

GIT 27 （10 mg）VGX-1027； 4,

AB-CHMINACA metabolite M5A （10 mg）1-（（4-hydroxycyclohexyl）methyl）-1H-indazole-3-carboxylic acid

Promethazine （hydrochloride） （10 g）Diprazin|Fellozine|Lergigan|Phenergan|Romergan,； N,N,α-trimethyl-10H-phenothiazine-10-ethanamine, monohydrochloride

BVT 948 （5 mg）4-hydroxy-3,3-dimethyl-2H-benz[g]indole-2,5（3H）-dione

CEP-33779N-[3-（4-methyl-1-piperazinyl）phenyl]-8-[4-（methylsulfonyl）phenyl]-[1,2,4]triazolo[1,5-a]pyridin-2-amine

Clinafloxacin （hydrochloride） （250 mg）AM1091,； 7-（3-ami-pyrrolidinyl）-8-chloro-1-cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid

Eicosapentaenoic Acid ethyl ester-d5 （500 ug）EPA ethyl ester-d5； 5Z,8Z,11Z,14Z,17Z-eicosapentaenoic acid, ethyl ester-d5

小鼠己糖激酶(HK)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法Difenoxin （hydrochloride） （1 mg）Diphenoxylic Acid|R 15403,； 1-（3-cyano-3,3-diphenylpropyl）-4-phenyl-4-piperidinecarboxylic acid, monohydrochloride

BB-22 RM （5 mg）QUCHIC,； 1-（cyclohexylmethyl）-8-quinolinyl ester-1H-indole-3-carboxylic acid