小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱：Mouse Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,，特異性強(qiáng),，重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換,。 
英文名稱：Mouse Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA Kit   
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實驗試劑,，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清,、血漿,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
種屬：人,、大鼠、小鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛,、羊,、雞、鴨,、魚等,。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器,、吸頭,、蒸餾水或去離子水，濾紙,。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,，靜置1小時備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）,。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用,。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,，或 者細(xì)胞超聲粉碎,，離心取上清液檢測。
3. 血清：在室溫下,，血液自然凝固,，以1000×g離心15分鐘，取上清待測,。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘,，收集上 清,。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液,，分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘,，收集上清,。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg,，加入500ul 的PBS,，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測,，應(yīng)將其分裝,，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟操作步驟：
1. 取出試劑盒,，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板,，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個濃度）,、空白孔,、待測樣品組。 注：為減少實驗誤差,，保證準(zhǔn)確性,，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水,；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對照孔除外）,。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時,。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔,，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次,，用吸水紙*拍干,。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul,。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項：
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時,，要控制加樣速度,，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,，從而影響 實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行,。
4. 反應(yīng)時間的控制：加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化，如果顏色較深,，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高,，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,，計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，試用幾個標(biāo)本）,，如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商,， 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液。一旦接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗,。
2． 實驗中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品,。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。

大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

桿菌屬 Lactobacillus sp.

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

PANC-1, 人胰腺細(xì)胞

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

TT(人甲狀腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

PA-1(人卵巢腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

球孢白僵菌 Beauveria bassiana

香菇 Lentinula edodes

藤黃微球菌 Micrococcus luteus

苜蓿中華根瘤菌

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

人膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

疣孢脆柄菇 Psathyrella velutina

B16(小鼠黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱：HEL（懸浮）

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人結(jié)腸細(xì)胞英文名稱：COLO 205

脂鏈球菌 Streptococcus cremoris

KB/鼻咽細(xì)胞株國產(chǎn)

糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus ML-090 （25 mg）5,，12-dihydro-quinoxalino[2,，3-b]quinoxaline； CCG-44699|CID-616479|NSC 179821|Fluoflavin,； ML-090

Dovitinib （5 mg）4-

CBP bromodomain Europium Chelate （420 wells）CBP bromodomain Europium Chelate

N-acetyl-3,，4-Methylenedioxymethcathinone （50 mg）N-

ABT-888 （hydrochloride） （5 mg）Veliparib； 2-[（2R）-2-methyl-2-pyrrolidinyl]-1H-benzimidazole-7-carboxamide, dihydrochloride

GW 4064 （10 mg）3-[2-[2-chloro-4-[[3-（2,6-dichlorophenyl）-5-（1-methylethyl）-4-isoxazolyl]methoxy]phenyl]ethenyl]-benzoic acid

SR 1664 （25 mg）4’-[[2,3-dimethyl-5-[[[（1S）-1-（4-nitrophenyl）ethyl]amino]carbonyl]-1H-indol-1-yl]methyl]-[1,1’-biphenyl]-2-carboxylic acid

（±）15-HEPE （50 ug）（±）-15-hydroxy-5Z,，8Z,，11Z，13E,，17Z-eicosapentaenoic acid,； （±）15-HEPE

（±）5，6-DHET lactone （100 ug）（±）5,，6-dihydroxy-8Z，11Z,，14Z-eicosatrienoic acid,， 1,，5-lactone； （±）5,，6-DiHETrE lactone,； （±）5，6-DHET lactone

Platencin （100 ug）3-[[3-[（2S,8S）-1,3,4,7,8,8aR-hexahydro-8-methyl-3-methylene-7-oxo-2H-2,4aS-ethanon-aphthalen-8-yl]-1-oxopropyl]amino]-2,4-dihydroxy-benzoic acid

Thioridazine （hydrochloride） （10 g）Aldazine|Mellaril,； 10-[2-（1-methyl-2-piperidinyl）ethyl]-2-（methylthio）-10H-phenothiazine, hydrochloride

Cathepsin G Inhibitor I （1 mg）P-

AM580 （10 mg）CD336|NSC 608001|Ro 40-6055,； 4-

4-fluoro PV8 （hydrochloride） （1 mg）4-fluoro α-PHPP|para-fluoro-PV8； 1-（4-fluorophenyl）-2-（pyrrolidin-1-yl）heptan-1-one, monohydrochloride

Modafinil （5 mg）CEP 1538|Nuvigil|Provigil,； 2-[（diphenylmethyl）sulfinyl]-acetamide

4-methoxy PV8 （hydrochloride） （5 mg）4-MeO-PV8|4-methoxy PHPP|p-MeO-PV8,； 1-（4-methoxyphenyl）-2-（pyrrolidin-1-yl）heptan-1-one, monohydrochloride

小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa試劑盒操作步驟ICI 118551 （hydrochloride） （25 mg）（2R,3R）-rel-1-[（2,3-dihydro-7-methyl-1H-inden-4-yl）oxy]-3-[（1-methylethyl）amino]-2-butanol, monohydrochloride

N-hydroxy MDA （hydrochloride） （exempt preparation） （1 mg）MDOH|N-hydroxy-3,4-Methylenedioxyamphetamine； N-hydroxy-α-methyl-1,3-benzodioxole-5-ethanamine, monohydrochloride