小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱：Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-Ⅰ ELISA Kit       檢測(cè)方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,，特異性強(qiáng),，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,，操作簡(jiǎn)便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。 
英文名稱：Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor Ⅰ,TNFsR-Ⅰ ELISA Kit 
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途：科研與實(shí)驗(yàn)試劑，不得用于臨床診斷,。
標(biāo)本：血清,、血漿、細(xì)胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水,、組織等,。
種屬：人、大鼠,、小鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛,、羊、雞,、鴨,、魚等。
小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘）,，微量加液器,、吸頭、蒸餾水或去離子水,，濾紙,。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定,，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,，靜置1小時(shí)備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿，此步驟忽略）,。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用,。
小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無菌管收集細(xì)胞上清液,，以1000×g離心15分鐘，收集上清,。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右，通過反復(fù)凍融,，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,，或 者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè),。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固,，以1000×g離心15分鐘,，取上清待測(cè)。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,，混合后靜置10-20 分鐘后,，以1000×g離心15分鐘，收集上 清,。
5. 體液：包括胸腹水,、腦脊液，分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,，以1000×g離心15分鐘，收集上清,。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本,，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS,，用手工或勻漿器,，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘,，收集上清進(jìn)行檢測(cè),。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測(cè),，應(yīng)將其分裝,，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa試劑盒操作步驟操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘,。
2. 分組：取出 96 孔板,，根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）,、空白孔、待測(cè)樣品組,。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差,，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,；空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本,。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對(duì)照孔除外）。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后,，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí),。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s,，充分清洗酶標(biāo)板 5 次,，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,，再加入顯色劑 B 液 50ul,。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液,。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染,。
2. 加樣：加樣時(shí),，要控制加樣速度,，避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,，如果顏色較深,，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,，如樣品濃度過高,，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,，可和所購經(jīng)銷商,， 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換,，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa試劑盒操作步驟安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液,。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗,。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食,、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。

異常漢遜酵母 Hansenula anomala

3T3-L1, 小鼠前脂肪細(xì)胞

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

少根根霉 Rhizopus arrhizus

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

檸檬形克勒克酵母 Kloeckera opiculata

爪哇根霉 Rhizopus javanicus

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

果香地霉 Colletotrichum musae

大鼠小小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa試劑盒操作步驟網(wǎng)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

黑色淺灰鏈霉菌 Streptomyces nigrogriseolus

大鼠肺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

微白黃鏈霉菌 Streptomyces albidoflavus

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

TF-1(人血液白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠骨髓瘤細(xì)胞英文名稱：FO

A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細(xì)胞株

SVEC4-10(小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

酸球菌 Lactococcus lactis

PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

不吸水鏈霉菌 Streptomyces ahygroscopocus

HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系 Human

 細(xì)胞名稱 種屬

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

點(diǎn)青霉 Penicillium notatum

枝孢霉 Cladosporium sp.

泡盛曲霉 Aspergillus awamori

小鼠腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞英文名稱：MA-891

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

NCI-H1688(人典型小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 Tiaprost （1 mg）7-[3,，5-dihydroxy-2-[3-hydroxy-4-（3-thienyloxy）-1-buten-1-yl]cyclopentyl]-5-heptenoic acid； Iliren,； Tiaprost

16-phenyl tetranor Prostaglandin E1 （10 mg）9-oxo-11,。alpha。,，15S-dihydroxy-16-phenyl-17,，18，19,，20-tetranor-prost-13E-en-1-oic acid,； 16-phenyl tetranor PGE1； 16-phenyl tetranor Prostaglandin E1

JWH 198 （10 mg）（4-methoxy-1-naphthalenyl）[1-[2-（4-morpholinyl）ethyl]-1H-indol-3-yl]-methanone,； JWH 198

16,，16-dimethyl Prostaglandin E2 （50 mg）9-oxo-11,。alpha。,，15R-dihydroxy-16,，16-dimethyl-prosta-5Z，13E-dien-1-oic acid,； 16,，16-dimethyl PGE2； 16,，16-dimethyl Prostaglandin E2

Prostaglandin F2α Alcohol methyl ether （10 mg）1-methoxy-9,。alpha。,，11,。alpha。,，15S-trihydroxyprosta-5Z,，13E-diene； AGN191129|PGF2α-OMe,； Prostaglandin F2α Alcohol methyl ether

13,，14-dihydro Prostaglandin F2α （5 mg）9。alpha,。,，11。alpha,。,，15S-trihydroxy-prost-5Z-en-1-oic acid； 13,，14-dihydro PGF2α,； 13，14-dihydro Prostaglandin F2α

Latanoprost ethyl amide （5 mg）N-ethyl-9,。alpha,。，11,。alpha,。，15R-trihydroxy-17-phenyl-18,，19,，20-trinor-prost-5Z-en-1-amide； Lat-NEt； Latanoprost ethyl amide

Beraprost （sodium salt） （10 mg）2,，3,，3a，8b-tetrahydro-2-hydroxy-1-（3-hydroxy-4-methyl-1-octen-6-ynyl）-1H-cyclopenta[b]benzofuran-5-butanoic acid,， monosodium salt,； ML 1129|Procyclin|TRK 10Beraprost （sodium salt）

20-trifluoro Leukotriene B4 （100 ug）5S，12R-dihydroxy-20,，20,，20-trifluoro-6Z，8E,，10E,，14Z-eicosatetraenoic acid； 20-trifluoro LTB4,； 20-trifluoro Leukotriene B4

小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa試劑盒操作步驟5（S）-HETE-d8 （100 ug）5S-hydroxy-6E,，8Z，11Z,，14Z-eicosatetraenoic-5,，6，8,，9,，11，12,，14,，15-d8 acid； 5（S）-HETE-d8

15（S）-HETrE （100 ug）15S-hydroxy-8Z,，11Z,，13E-eicosatrienoic acid； 15（S）-HETrE

Methoxylamine HCl （100 dtn （0,。1 g））Methoxylamine HCl

Prostaglandin E2 EIA Monoclonal Antibody （500 dtn）Prostaglandin E2 EIA Monoclonal Antibody