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小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-03-15 11:53:41瀏覽次數(shù):178次

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小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱:Mouse Plaet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA Kit       檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法,。其試劑穩(wěn)定、易保存,,操作簡(jiǎn)便,。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。
小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一,、標(biāo)本要求 
1
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。 
2
.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二,、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑,,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,,不同總批號(hào)的試劑不能混用,。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,標(biāo)本可存放于28℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),,標(biāo)本-20℃保存,,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,,并扣干微孔中的殘余液體,,否則將降低精確度,,造成吸光度偏離的假像,。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,,以便使孔中的液體充分混勻,。
8. 試劑盒保存于28℃,請(qǐng)勿冷凍,,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示,。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,,室溫放置至少30分鐘,。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,,吸頭,,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水119倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水14倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,,充分混勻待用,。)
小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔,、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔,、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照,、陽(yáng)性對(duì)照 50µl,。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,,如此 重復(fù) 5 次,,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,,空白孔除外,。
7.溫育:操作同 3
8.洗滌:操作同 5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.
終止:每孔加終止液 50µl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

異常漢遜酵母 Hansenula anomala

A2(人腺樣囊性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

少根根霉 Rhizopus arrhizus

棲糖蜜棒桿菌 Corynebacterium melassecola

異常畢赤酵母 Pichia anomala

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

唾液桿菌水楊素亞種 Lactobacillus salivarius subsp. salicinius

大鼠雪旺氏細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

猴菌

肺形側(cè)耳,,平菇 Pleurotus pulmonarius

球孢白僵菌 Beauveria bassiana

苜蓿中華根瘤菌

TMB Kit/TMB底物顯色試劑盒(可溶型)100ml100ml

彎曲桿菌 Lactobacillus curvatus

C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

小鼠艾氏腹水細(xì)胞英文名稱:EAC

酸克魯維酵母 Kluyveromyces lactis

One Step Western Kit HRP (Rabbit)/一步法快速WB(HRP)試劑盒(兔)50次2次,、10次、50次gersion

IEC-6/大鼠小腸上皮細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)

MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 人腺細(xì)胞 Human

C6(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 Diphenyleneiodonium Chloride (1 mg)dibenziodolium chloride,; DPI Chloride,; Diphenyleneiodonium Chloride

FK-409 (10 mg)4-ethyl-2E-(hydroxyimino)-5-nitro-3E-hexenamide; NOR-3,; FK-409

Arachidoyl glycine (10 mg)N-(1-oxoeicosyl)-glycine,; Arachidoyl glycine

CEP-Lysine-d4 (1 mg)(S)-2-amino-6-(2-(2-carboxy-ethyl)-1H-pyrrol-1-yl)-hexanoic-2,2’,3,,3’-d4-acid,; CEP-Lysine-d4

JWH 018 6-hydroxyindole metabolite (10 mg)(6-hydroxy-1-pentyl-1H-indol-3-yl)(naphthalen-1-yl)-methanone; JWH 018 6-hydroxyindole metabolite

JWH 398 2-chloronaphthyl isomer (1 mg)(2-chloronaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone,; JWH 398 2-chloronaphthyl isomer

AM1220 (5 mg)[1-[(1-methyl-2-piperidinyl)methyl]-1H-indol-3-yl]-1-naphthalenyl-methanone,; [1-[(1-methyl-2-piperidinyl)methyl]-1H-indol-3-yl]-1-naphthalenyl-methanone; AM1220

Leukotriene C4-d5 methyl ester (100 ug)5S-hydroxy-6R-(S-glutathionyl)-7E,,9E,,11Z,14Z-d5-eicosatetraenoic acid,, methyl ester,; LTC4-d5 methyl ester; Leukotriene C4-d5 methyl ester

Docosatrienoic Acid (10 mg)13Z,,16Z,,19Z-docosatrienoic acid; Docosatrienoic Acid

2-Fluoropalmitic Acid (5 mg)2-fluorohexadecanoic acid,; 2-Fluoropalmitic Acid

Lisdexamfetamine (hydrochloride) (10 mg)(2S)-2,,6-diamino-N-[(1S)-1-methyl-2-phenylethyl]-hex*, dihydrochloride,; Lisdexamphetamine,; Lisdexamfetamine (hydrochloride)

Risperidone (10 mg)3-[2-[4-(6-fluoro-1,2-benzisoxazol-3-yl)-1-piperidinyl]ethyl]-6,,7,,8,9-tetrahydro-2-methyl-4H-pyrido[1,,2-a]pyrimidin-4-one,; Apexidone|Psychodal|R 64766|Spiron; Risperidone

小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 IWP-3 (25 mg)2-[[3-(4-fluorophenyl)-3,,4,6,,7-tetrahydro-4-oxothieno[3,,2-d]pyrimidin-2-yl]thio]-N-(6-methyl-2-benzothiazolyl)-acetamide; Inhibitor of Wnt Production-3,; IWP-3

Δ4-Dafachronic Acid (10 mg)3-oxo-cholest-4-en-26-oic acid,; 3-keto-4-Cholestenoic Acid; Δ4-Dafachronic Acid

EBPC (10 mg)2,,5-dihydro-4-hydroxy-5-oxo-1-(phenylmethyl)-1H-pyrrole-3-carboxylic acid,, ethyl ester; NSC 22953EBPC

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