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小鼠5核苷酸酶(5-NT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-03-15 11:47:37瀏覽次數(shù):271次

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小鼠5核苷酸酶(5-NT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱:Mouse 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit       檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法,。其試劑穩(wěn)定,、易保存,操作簡便,。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠5核苷酸酶(5-NT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一,、標(biāo)本要求 
1
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。 
2
.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
小鼠5核苷酸酶(5-NT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二,、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,,試劑應(yīng)視為傳染物,,不同總批號的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,。室溫放置至少30分鐘,,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘,。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于28℃,。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),,標(biāo)本-20℃保存,,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,,并扣干微孔中的殘余液體,,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像,。
7. 加樣完畢后,,應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻,。
8. 試劑盒保存于28℃,,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示,。
三,、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘,。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,,如微量移液器,吸頭,,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水119倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水14倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,,按照1100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用,。)
小鼠5核苷酸酶(5-NT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔,、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照 50µl,。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,,如此 重復(fù) 5 次,,拍干,。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外,。
7.溫育:操作同 3,。
8.洗滌:操作同 5
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,,再加入顯色劑 B50µl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.
終止:每孔加終止液 50µl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值),。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

人表皮細(xì)胞英文名稱:A431

AGS人胃腺細(xì)胞 Human

HCT-8全細(xì)胞裂解液100ug100ug

平菇 Pleurotus ostreatus

試劑耗材

磚紅鐮孢 Fusarium lateritium

葡萄汁有孢漢遜酵母 Hanseniaspora uvarum

暫無 Penicillium amagasakiense

熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

天藍(lán)色鏈霉菌 Streptomyces coelicolor

根瘤菌 Rhizobium sp.

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

人主動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

茯苓 Poria cocos

Sf-9(昆蟲細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

6T-CEM (人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人結(jié)腸細(xì)胞英文名稱:CW-2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

KATO III(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

黑木耳 Auricularia auriculaΔ4-Dafachronic Acid (5 mg)3-oxo-cholest-4-en-26-oic acid; 3-keto-4-Cholestenoic Acid,; Δ4-Dafachronic Acid

EBPC (5 mg)2,,5-dihydro-4-hydroxy-5-oxo-1-(phenylmethyl)-1H-pyrrole-3-carboxylic acid, ethyl ester,; NSC 22953EBPC

DAPI (hydrochloride) (25 mg)2-[4-(aminoiminomethyl)phenyl]-1H-indole-6-carboximidamide,, dihydrochloride; 4’,,6-Diamidino-2-phenylindole|FxCycle Violet,; DAPI (hydrochloride)

RCS-4 N-pentanoic acid metabolite-d5 (100 ug)5-(3-(4-methoxybenzoyl)-1H-indol-1-yl-2,4,,5,,6,,7-d5)-pentanoic acid,; RCS-4 N-pentanoic acid metabolite-d5

8-bromo-Cyclic AMP (sodium salt) (5 mg)8-bromo-cyclic 3’,5’-(hydrogen phosphate)-adenosine,, monosodium salt,; 8-bromo-cAMP (sodium salt); 8-bromo-Cyclic AMP (sodium salt)

BB-22 6-hydroxyquinoline isomer (10 mg)quinolin-6-yl 1-(cyclohexylmethyl)-1H-indole-3-carboxylate,; BB-22 6-hydroxyquinoline isomer

PB-22 N-(5-hydroxypentyl)-3-carboxyindole metabolite (1 mg)1-(5-hydroxypentyl)-1H-indole-3-carboxylic acid,; PB-22 N-(5-hydroxypentyl)-3-carboxyindole metabolite

Clemastine (fumarate) (250 mg)(2R)-2-[2-[(1R)-1-(4-chlorophenyl)-1-phenylethoxy]ethyl]-1-methyl-(2E)-2-butenedioate-pyrrolidine; Clemastine (fumarate)

25E-NBOMe (hydrochloride) (50 mg)2-(4-ethyl-2,,5-dimethoxyphenyl)-N-(2-methoxybenzyl)ethan-1-amine,, monohydrochloride; 2C-E-NBOMe,; 25E-NBOMe (hydrochloride)

Ceftazidime (hydrate) (5 g)1-[[(6R,,7R)-7-[[(2Z)-(2-amino-4-thiazolyl)[(1-carboxy-1-methylethoxy)imino]acetyl]amino]-2-carboxy-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4,。2。0]oct-2-en-3-yl]methyl]-pyridinium,, pentahydrate,; Starcef 1; Ceftazidime (hydrate)

小鼠5核苷酸酶(5-NT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法4(Z),,7(Z),,10(Z)-Tridecatrienoic Acid-d5 (1 mg)(4Z,7Z,,10Z)-trideca-4,,7,10-trienoic-12,,12’,,13,13,,13-d5 acid,; 4(Z),7(Z),,10(Z)-Tridecatrienoic Acid-d5

Zoledronic Acid (hydrate) (500 mg)P,,P’-[1-hydroxy-2-(1H-imidazol-1-yl)ethylidene]bis-phosphonic acid, monohydrate,; Zoledronic Acid (hydrate)

Monastrol (10 mg)1,,2,3,,4-tetrahydro-4-(3-hydroxyphenyl)-6-methyl-2-thioxo-5-pyrimidinecarboxylic acid,, ethyl ester; Monastrol

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