詳細(xì)介紹
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)elisa試劑盒操作步驟 英文名稱:Mouse cross linked N-opeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實驗方法,。其試劑穩(wěn)定,、易保存,操作簡便,。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換,。
英文名稱:Mouse cross linked N-opeptide of type Ⅰ collagen,NTX ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷,。
標(biāo)本:血清,、血漿、細(xì)胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水,、組織等,。
種屬:人、大鼠,、小鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛,、羊、雞,、鴨,、魚等。
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),,微量加液器,、吸頭、蒸餾水或去離子水,,濾紙,。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,靜置1小時備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)elisa試劑盒操作步驟樣品收集,、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無菌管收集細(xì)胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測,。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測,。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進(jìn)行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心,。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個濃度),、空白孔、待測樣品組,。 注:為減少實驗誤差,,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本,。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時,。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,,再加入顯色劑 B 液 50ul,。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時,,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,,從而影響 實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行,。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,,如樣品濃度過高,,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,試用幾個標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,,可和所購經(jīng)銷商,, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要進(jìn)食,、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
真姬菇 Hypsizigus marmoreus
異常漢遜酵母 Hansenula anomala
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
SK-BR-3(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
GNM(人口腔鱗頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
人腎透細(xì)胞腺細(xì)胞英文名稱:786-0
RM1(大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
根瘤菌
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
Streptavidin-HRP(Ready to Use)/Streptavidin-HRP(IHC工作液)3ml,、18ml國產(chǎn)
屎腸球菌 Enterococcus faecium
貝葉多孔菌
VCaP(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
膠紅酵母 Kocuria rosea
Chang liver (CCL13) (人張氏肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
801-D (人巨細(xì)胞性肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
球菌屬 Lactococcus sp.
P388D1(小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion FK-409 (5 mg)4-ethyl-2E-(hydroxyimino)-5-nitro-3E-hexenamide,; NOR-3; FK-409
Arachidoyl glycine (100 mg)N-(1-oxoeicosyl)-glycine,; Arachidoyl glycine
CEP-Lysine-d4 (5 mg)(S)-2-amino-6-(2-(2-carboxy-ethyl)-1H-pyrrol-1-yl)-hexanoic-2,,2’,3,,3’-d4-acid; CEP-Lysine-d4
JWH 018 6-hydroxyindole metabolite (5 mg)(6-hydroxy-1-pentyl-1H-indol-3-yl)(naphthalen-1-yl)-methanone,; JWH 018 6-hydroxyindole metabolite
JWH 398 2-chloronaphthyl isomer (10 mg)(2-chloronaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone,; JWH 398 2-chloronaphthyl isomer
JWH 022 (1 mg)1-naphthalenyl[1-(4-penten-1-yl)-1H-indol-3-yl]-methanone; AM2201 N-(4-pentenyl) analog,; JWH 022
Leukotriene C4-d5 methyl ester (25 ug)5S-hydroxy-6R-(S-glutathionyl)-7E,,9E,11Z,,14Z-d5-eicosatetraenoic acid,, methyl ester; LTC4-d5 methyl ester,; Leukotriene C4-d5 methyl ester
Docosatrienoic Acid (100 mg)13Z,,16Z,,19Z-docosatrienoic acid; Docosatrienoic Acid
2-Fluoropalmitic Acid (50 mg)2-fluorohexadecanoic acid,; 2-Fluoropalmitic Acid
Lisdexamfetamine (hydrochloride) (25 mg)(2S)-2,,6-diamino-N-[(1S)-1-methyl-2-phenylethyl]-hex*, dihydrochloride,; Lisdexamphetamine,; Lisdexamfetamine (hydrochloride)
小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)elisa試劑盒操作步驟Risperidone (100 mg)3-[2-[4-(6-fluoro-1,2-benzisoxazol-3-yl)-1-piperidinyl]ethyl]-6,,7,,8,9-tetrahydro-2-methyl-4H-pyrido[1,,2-a]pyrimidin-4-one,; Apexidone|Psychodal|R 64766|Spiron; Risperidone
IWP-3 (5 mg)2-[[3-(4-fluorophenyl)-3,,4,,6,7-tetrahydro-4-oxothieno[3,,2-d]pyrimidin-2-yl]thio]-N-(6-methyl-2-benzothiazolyl)-acetamide,; Inhibitor of Wnt Production-3; IWP-3