詳細介紹
大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa試劑盒實驗方法 英文名稱:Rat P-Selectin ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,,重復性好的實驗方法,。其試劑穩(wěn)定、易保存,,操作簡便,。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換,。
大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa試劑盒實驗方法一,、標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融,。
2.不能檢測含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa試劑盒實驗方法二,、注意事項
1. 此試劑為體外檢測試劑,,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,,不同總批號的試劑不能混用,。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時內(nèi)進行實驗,,標本可存放于2~8℃。不需及時實驗,,標本-20℃保存,,避免反復凍融。
6. 在反復清洗微孔板,,并扣干微孔中的殘余液體,,否則將降低精確度,,造成吸光度偏離的假像,。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條,,以便使孔中的液體充分混勻,。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,,有效期請見盒內(nèi)標示,。
三、實驗前準備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,,室溫放置至少30分鐘,。
2.準備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,,吸頭,,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,,充分混勻待用,。)
大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa試劑盒實驗方法操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔,、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照 50µl,。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,,如此 重復 5 次,,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,,空白孔除外,。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白空調(diào)零,,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值),。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。
大鼠內(nèi)臟脂肪細胞*培養(yǎng)基100mL
傘枝犁霉 Absidia corymbifera
BRL-3A(大鼠正常肝細胞)5×106cells/瓶×2
異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala
大鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus
黑曲霉變種 Aspergillus niger var.
酒假絲酵母 Candida kefyr
鹽水球菌 Salinococcus sp.
解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica
U251人膠質(zhì)瘤細胞
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
GBC-SD, 人膽囊細胞
小金色鏈霉菌 Streptomyces microaureus
假單胞菌 Pseudomonas sp.
PANC-1, 人胰腺細胞gersion
蘇云金芽胞桿菌日本亞種 Bacillus thuringiensis subsp. japanensis
A549/DDP, 人肺腺耐藥細胞株 Human
肺英文名稱:Lewis瘤
伯頓畢赤酵母 Pichia burtonii
EL4(小鼠淋巴瘤細胞)5×106cells/瓶×2
尖孢鐮刀菌黃瓜?;?Fusarium oxysporium f. sp. cucumerinum
檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum D-α-Hydroxyglutaric Acid (sodium salt) (250 mg)D-2-HG|D-2-Hydroxyglutaric Acid,; 2R-hydroxy-pentanedioic acid, disodium salt
I-BET762 (25 mg)GSK525762A; (S)-2-(6-(4-chlorophenyl)-8-methoxy-4H-benzo[f][1,2,4]triazolo[4,3-a][1,4]diazepin-4-yl)-N-ethylacetamide
(±)18-HEPE (25 ug)(±)-18-hydroxy-5Z,,8Z,,11Z,14Z,,16E-eicosapentaenoic acid,; (±)18-HEPE
(±)8,,9-DHET (50 ug)(±)8,9-dihydroxy-5Z,,11Z,,14Z-eicosatrienoic acid; (±)8,,9-DiHETrE,; (±)8,9-DHET
D609 (potassium salt) (10 mg)Tricyclodecan-9-yl xanthogenate,; O-(octahydro-4,7-methaH-inden-5-yl) ester, carbonodithioic acid, monopotassium salt
RH-34 (1 mg)3-[2-[[(2-methoxyphenyl)methyl]amino]ethyl]-2,4(1H,3H)-quinazolinedione
SANT 1 (1 mg)N-
GSK 429286A (1 mg)N-(6-fluoro-1H-indazol-5-yl)-1,4,5,6-tetrahydro-2-methyl-6-oxo-4-[4-(trifluoromethyl)phenyl]-3-pyridinecarboxamide
α-Pyrrolidinobutiothiophenone (hydrochloride) (10 mg)α-PBT,; 2-(pyrrolidin-1-yl)-1-(thiophen-2-yl)butan-1-one, monohydrochloride
Carvedilol (250 mg)BM 14190|Dilatrend|SKF 105517|Talliton; 1-(9H-carbazol-4-yloxy)-3-[[2-(2-methoxyphenoxy)ethyl]amino]-2-propanol
ATM4 4-acetoxy analog (5 mg)N-[2-[5-(acetyloxy)-3,6-dimethoxy-1-phenanthrenyl]ethyl]-N-methyl-acetamide
Isoproterenol (hydrochloride) (100 mg)Isoprenaline|NSC 37745|NSC 89747,; 4-[1-hydroxy-2-[(1-methylethyl)amino]ethyl], monohydrochloride
大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)elisa試劑盒實驗方法4-Methoxyamphetamine (hydrochloride) (exempt preparation) (1 mg)4-MA|PMA|p-MA|para-Methoxyamphetamine,; 4-methoxy-α-methyl-benzeneethanamine, monohydrochloride
Nortriptyline (hydrochloride) (50 mg)Acetexa|Pamelor; 3-(10,11-dihydro-5H-dibenzo[a,d]cyclohepten-5-ylidene)-N-methyl-1-propanamine, monohydrochloride
Metolazone (10 mg)SR 720-22|Zaroxolyn,; 7-chloro-1,2,3,4-tetrahydro-2-methyl-3-(2-methylphenyl)-4-oxo-6-quinazolinesulfonamide