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小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)elisa試劑盒操作步驟

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產(chǎn)品型號

品       牌R&D/美國

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2017-03-15 11:33:40瀏覽次數(shù):199次

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用途:本試劑盒僅供科研使用,,定量檢測細(xì)胞液,、體液、組織,、血清,、血漿等標(biāo)本小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)elisa試劑盒操作步驟含量,。

小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA Kit       檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個工作日內(nèi)包退換,。 
英文名稱:Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,不得用于臨床診斷,。
標(biāo)本:血清,、血漿、細(xì)胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓、心房水,、胸房水,、組織等。
種屬:人,、大鼠,、小鼠、兔子,、豬,、犬、猴、馬,、牛,、羊、雞,、鴨,、魚等。
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),,微量加液器,、吸頭、蒸餾水或去離子水,,濾紙,。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,靜置1小時備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)elisa試劑盒操作步驟樣品收集,、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,,通過反復(fù)凍融,,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,,離心取上清液檢測,。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,,以1000×g離心15分鐘,收集上 清,。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,,稱取重量0.5mg,,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,,應(yīng)將其分裝,,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(個濃度),、空白孔、待測樣品組,。 注:為減少實驗誤差,,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水,;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本,。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時,。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A  50ul 后,,再加入顯色劑 B  50ul,。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時,,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時間,,從而影響 實驗的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進(jìn)行,。
4. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。
5. 建議實驗前預(yù)測樣品含量,,如樣品濃度過高,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,,計算結(jié)果時乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時先做預(yù)實驗(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個標(biāo)本),,如果對本試劑盒有任何疑問,,可和所購經(jīng)銷商, 如果因運輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,,可要求調(diào)換,,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗,。
2. 實驗中不要進(jìn)食,、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

異常漢遜酵母 Hansenula anomala

二色小單孢菌 Micromonospora bicolor

田菁根瘤菌 Azorhizobium canlinodans

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

屎腸球菌 Enterococcus faecium

灰葡萄孢 Botrytis cinerea

青色小四孢菌

小鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞英文名稱:MouseS

三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii

LA795(小鼠肺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞

人臍帶單核細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

OP9(小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞gersion

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

MA-782(小鼠腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

直喙鐮孢

HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞 Human

香菇 Lentinula edodes

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

雙孢蘑菇 Agaricus bisporus

蛹蟲草(北冬蟲夏草,,北蟲草) Cordyceps militaris

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

蟲草 Cordyceps sp.

Annexin V,, 重組的Annexin V, Recombinant

Cyanine 5炔烴 [相當(dāng)于Cy5炔烴]Cyanine 5 alkyne [equivalent to Cy5 alkyne]

DiYO-3 (替代YO-YO 3)DiYO-3 (equivalent to YO-YO 3)

Atpenin A5 (250 ug)3-[(2S,,4S,,5R)-5,6-dichloro-2,,4-dimethyl-1-oxohexyl]-4-hydroxy-5,,6-dimethoxy-2(1H)-pyridinone; Antibiotic FO 125A5,; Atpenin A5

para-Methoxyamphetamine (hydrochloride) (10 mg)4-methoxy-α-methyl-benzeneethanamine,, monohydrochloride; 4-MA,; para-Methoxyamphetamine (hydrochloride)

2-Pyridylamide oxime (500 mg)N-hydroxy-2-pyridinecarboximidamide,; Picolinic Acid Amidoxime; 2-Pyridylamide oxime

Fucoxanthin (5 mg)6’R,,7’-didehydro-5R,,6-epoxy-4’,5’,,6S,,7-tetrahydro-3S,3’S,,5’R-trihydroxy-β,,β-caroten-8(5H)-one; α-Carotene,; Fucoxanthin

(E)-C-HDMAPP (ammonium salt) (500 ug)P’-[(3E)-5-hydroxy-4-methyl-3-penten-1-yl]-isohypophosphoric acid,, triammonium salt; (E)-1-Hydroxy-2-Methylbut-2-enyl 4-Diphosphate (ammonium salt),; (E)-C-HDMAPP (ammonium salt)

3-dodecanoyl-NBD Cholesterol (1 mg)12-[(7-nitro-2,,1,3-benzoxadiazol-4-yl)amino]-(3S,,10R,,13R)-3-methoxy-10,13-dimethyl-17-((R)-6-methylheptan-2-yl)-tetradecahydro-1H-cyclopenta[α]phenanthrene,; 3-C12-NBD Cholesterol,; 3-dodecanoyl-NBD Cholesterol

CB-86 (10 mg)N-cyclopropyl-8-[3-(1,1-dimethylheptyl)-5-hydroxyphenoxy]-oct*,; CB-86

LY364947 (10 mg)4-[3-(2-pyridinyl)-1H-pyrazol-4-yl]-quinoline,; TGF-β RI Kinase Inhibitor|HTS 466284,; LY364947

(+)-Warfarin (25 mg)4-hydroxy-3-[(1R)-3-oxo-1-phenylbutyl]-2H-1-benzopyran-2-one,; (R)-Warfarin,; (+)-Warfarin

小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)elisa試劑盒操作步驟 JWH 019 (10 mg)(1-hexyl-1H-indol-3-yl)-1-naphthalenyl-methanone; JWH 019

16,,16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1 (1 mg)6,,9-dioxo-11。alpha,。,,15R-dihydroxy-16,16-dimethyl-prost-13E-en-1-oic acid,; 16,,16-dimethyl-6-keto PGE1; 16,,16-dimethyl-6-keto Prostaglandin E1

Pirfenidone (10 mg)5-methyl-1-phenyl-2(1H)-pyridinone,; AMR 69|Deskar|Pirespa; Pirfenidone

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