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小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-03-14 17:01:02瀏覽次數(shù):239次

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小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱:Mouse Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法,。其試劑穩(wěn)定、易保存,,操作簡(jiǎn)便,。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。 
小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一,、標(biāo)本要求 
1
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。 
2
.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。
小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二,、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,,試劑應(yīng)視為傳染物,,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,。室溫放置至少30分鐘,,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,標(biāo)本可存放于28℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),,標(biāo)本-20℃保存,,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,,并扣干微孔中的殘余液體,,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像,。
7. 加樣完畢后,,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻,。
8. 試劑盒保存于28℃,,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示,。
三,、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘,。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,,如微量移液器,吸頭,,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水119倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水14倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,,按照1100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用,。)
小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),,每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔,、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照,、陽(yáng)性對(duì)照 50µl,。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,,拍干,。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外,。
7.溫育:操作同 3,。
8.洗滌:操作同 5
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,,再加入顯色劑 B50µl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.
終止:每孔加終止液 50µl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

大鼠腦靜脈血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

HCT 116(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

改良亞硫酸鹽瓊脂/Sulfite Agar Modified嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)的計(jì)數(shù)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

NCI-H157(人非小細(xì)胞肺腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

人肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

高鹽察氏瓊脂/高鹽察氏培養(yǎng)基/Salt Czapek Dox Agar用于霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)的腎細(xì)胞英文名稱:COS-1

木糖發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

大鼠肝細(xì)胞英文名稱:BRL

五號(hào)膽鹽/5號(hào)膽鹽/膽鹽5號(hào)/膽酸-脫氧膽酸鈉鹽混合物/Bile salt No. 5BR,,70%25克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit/Super Polymer-二步法IHC試劑盒3ml,、18ml國(guó)產(chǎn)

RAG(小鼠腎腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

PC-12(高分),PC12,,大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分細(xì)胞株(高分)gersion

PATU8988(人胰腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MG-63, 人骨瘤細(xì)胞gersion

MSTO-211H(人肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

AtT-20(小鼠垂體瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

DH82(犬巨噬細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠下結(jié)締組織細(xì)胞英文名稱:A9 25-hydroxy Vitamin D3 (10 mg)4-[(2Z)-2-[(5S)-5-hydroxy-2-methylenecyclohexylidene]ethylidene]octahydro-α,α,,ε,,7a-tetramethyl-(εR,1R,,3aS,,4E,7aR)-1H-indene-1-pentanol,; 25-hydroxy Cholecalciferol|RO 8-8892|Rovimix Hy-D|U 32070E,; 25-hydroxy Vitamin D3

JWH 073 N-butanoic acid metabolite-d5 (1 mg)4-(3-(1-naphthoyl)-1H-indol-1-yl)-2,4,,5,,6,7-d5-butanoic acid,; JWH 073 N-butanoic acid metabolite-d5

JWH 122 5-methylnaphthyl isomer (10 mg)(5-methylnaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone,; JWH 122 5-methylnaphthyl isomer

25C-NBOMe (hydrochloride) (1 mg)2-(4-chloro-2,,5-dimethoxyphenyl)-N-(2-methoxybenzyl)ethanamine, monohydrochloride,; 2C-C-NBOMe,; 25C-NBOMe (hydrochloride)

Arvanil (100 mg)N-[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]-5Z,8Z,,11Z,,14Z-eicosatetraenamide; N-Vanillylarachidonamide,; Arvanil

Dihomo-γ-Linolenic Acid (100 mg)8Z,,11Z,14Z-eicosatrienoic acid,; DGLA,; Dihomo-γ-Linolenic Acid

O-Arachidonoyl Ethanolamine (hydrochloride) (1 mg)O-(2-aminoethyl)-5Z,8Z,,11Z,,14Z-eicosatetraenester, monohydrochloride,; Arachidonic Acid-(2-aminoethyl)-ester|O-AEA|Virodhamine,; O-Arachidonoyl Ethanolamine (hydrochloride)

CID-2745687 (25 mg)1-

Nocodazole (100 mg)N-[6-(2-thienylcarbonyl)-1H-benzimidazol-2-yl]-methyl ester-carbamic acid; NSC 238159|Oncodazole|R 17934,; Nocodazole

小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法Pirfenidone (100 mg)5-methyl-1-phenyl-2(1H)-pyridinone,; AMR 69|Deskar|Pirespa; Pirfenidone

CID-2858522 (10 mg)1-[3,,5-bis(1,,1-dimethylethyl)-4-hydroxyphenyl]-2-[2-[(3-hydroxypropyl)amino]-5,6-dimethyl-1H-benzimidazol-1-yl]-ethanone,; ML-029,; CID-2858522

MBDB (hydrochloride) (10 mg)α-ethyl-N-methyl-1,3-benzodioxole-5-ethanamine,, monohydrochloride,; N-Methyl-1,3-Benzodioxolylbutanamine,; MBDB (hydrochloride)

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