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小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-03-14 16:39:19瀏覽次數(shù):275次

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小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱:Mouse alkaline phosphatase,ALP ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法,。其試劑穩(wěn)定,、易保存,操作簡(jiǎn)便,。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一,、標(biāo)本要求 
1
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。 
2
.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二,、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑,,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,,不同總批號(hào)的試劑不能混用,。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,標(biāo)本可存放于28℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),,標(biāo)本-20℃保存,,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,,并扣干微孔中的殘余液體,,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像,。
7. 加樣完畢后,,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻,。
8. 試劑盒保存于28℃,,請(qǐng)勿冷凍,,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三,、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,,如微量移液器,,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水119倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水14倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,,按照1100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,,充分混勻待用。)
小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),,每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔,、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰,、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl,。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,,然后再加待測(cè)樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,,如此 重復(fù) 5 次,,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,,空白孔除外,。
7.溫育:操作同 3
8.洗滌:操作同 5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.
終止:每孔加終止液 50µl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。

小麥胚芽粉/Wheat gern powderBR500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

SP Mouse HRP Kit(DAB)/鼠Streptavidin-HRP試劑盒(帶DAB顯色液)3ml、18ml國(guó)產(chǎn)

NCI-H520(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

OVCAR-3(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MDA-MB-231(ATCC來(lái)源), 人腺細(xì)胞

LoVo(人大腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

HFF-1(人包成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

769-P(人腎細(xì)胞腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

COLO 205(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠淋巴瘤細(xì)胞英文名稱:EL4.IL-2

A3(人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

神經(jīng)膠質(zhì)瘤英文名稱:G422瘤

Andersons Rhododendron Medium with VitaminsBR10升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

人腺成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

SCCRAM湯/SCCRAM Broth濾膜法食品中沙門(mén)氏菌前增菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

HCCC-9810(人肝內(nèi)膽管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

甘氨酸培養(yǎng)基/Glycine Medium彎曲桿菌甘氨酸耐受性試驗(yàn)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

人前列腺細(xì)胞英文名稱:PC-3

TPY瓊脂培養(yǎng)基/TPY Medium用于雙岐桿菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

人腹膜毛細(xì)血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

緩沖MUG瓊脂/緩沖4-甲基傘形酮葡糖苷酸瓊脂/Buffered MUG Agar濾膜MUG法檢測(cè)食品中大腸菌數(shù)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液-BSA5x1ml國(guó)產(chǎn)

牛膽粉/牛膽汁粉/牛膽抽提液/Bile powder of cowBR,,40%100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

大鼠肺泡巨噬細(xì)胞英文名稱:NR8383碳?xì)溻c(25GM)Sodium Bicarbonate ,, Endotoxin and cell culture tested.

泛鈣(25GM)D-Calcium Pantothenate, CAS# 137-08-6,; MW 238.27,; USP

5-TAMRA, SE [5-羧基四甲基羅丹明,,琥珀酰亞胺酯] 單體5-TAMRA,, SE [5-Carboxytetramethylrhodamine, succinimidyl ester] Single isomer

臺(tái)盼超級(jí)藍(lán)鈉鹽 0,。1M水溶液Trypan UltraBlue,, sodium salt 0。1 M aqueous solution

Caspase 9熒光底物(Ac-LEHD)2-R110(Ac-LEHD)2-R110

鈣離子熒光探針Rhod-2,, AM 超級(jí)純Rhod-2,, AM UltraPure Grade

6-熒光素氨基磷酯6-Fluorescein phosphoramidite

iFluor 532-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/mliFluor 532-streptavidin conjugate 1 mg/ml

Cyanine 3。5胺 [相當(dāng)于Cy3,。5胺]Cyanine 3,。5 amine [equivalent to Cy3。5 amine]

Cy5NS 琥珀酰亞胺酯Cy5NS succinimidyl ester

2C-H (hydrochloride) (10 mg)2,,5-dimethoxy-benzeneethanamine,, monohydrochloride; 2,,5-Dimethoxyphenethylamine,; 2C-H (hydrochloride)

BIM5078 (25 mg)1-[(2-chloro-5-nitrophenyl)sulfonyl]-2-methyl-1H-benzimidazole; BIM5078

17-phenyl trinor Prostaglandin D2 (5 mg)9,。alpha,。,15S-dihydroxy-11-oxo-17-phenyl-18,,19,,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid,; 17-phenyl trinor PGD2,; 17-phenyl trinor Prostaglandin D2

2-amino-5-methyl-4-phenyl Thiazole (500 mg)5-methyl-4-phenyl-2-thiazolamine; NSC 54435,; 2-amino-5-methyl-4-phenyl Thiazole

CAY10587 (5 mg)4-[2-(2-methylphenyl)ethynyl]-benzenepropanoic acid,; CAY10587

N-octadecanoyl-L-Homoserine lactone (50 mg)N-[(3S)-tetrahydro-2-oxo-3-furanyl]-octadec*,; C18-HSL; N-octadecanoyl-L-Homoserine lactone

小鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 MS-275 (25 mg)N-[[4-[[(2-aminophenyl)amino]carbonyl]phenyl]methyl]-3-pyridinylmethyl ester,, carbamic acid,; SNDX 275|Entinostat; MS-275

ST638 (10 mg)2-cyano-3-[3-ethoxy-4-hydroxy-5-[(5-phenylthio)methyl]phenyl]-2-propenamide,; ST638

Celastramycin A (10 mg)(3-chloro-5-hexyl-2,,6-dihydroxyphenyl)(4,5-dichloro-1H-pyrrol-3-yl)-methanone,; Celastramycin A

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