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小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟

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品       牌R&D/美國(guó)

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-03-13 10:09:50瀏覽次數(shù):308次

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用途:本試劑盒僅供科研使用,,定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液,、組織、血清,、血漿等標(biāo)本小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟的含量,。

小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱:Mouse 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit       檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法,。其試劑穩(wěn)定、易保存,,操作簡(jiǎn)便,。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱:Mouse 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit  
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,,不得用于臨床診斷,。
標(biāo)本:血清、血漿,、細(xì)胞上清液,、尿液、體液,、灌洗液,、腦脊髓、心房水,、胸房水,、組織等。
種屬:人,、大鼠,、小鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛,、羊,、雞、鴨,、魚等,。
小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器,、吸頭,、蒸餾水或去離子水,濾紙,。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,,如果樣品量不夠或者不確定,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用,。
小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟樣品收集,、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,,或 者細(xì)胞超聲粉碎,,離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè),。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清,。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,,分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,,加入500ul PBS,,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,,-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心,。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),,把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(個(gè)濃度)、空白孔,、待測(cè)樣品組,。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,,建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水,;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本,。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外),。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,,靜置 15-30s,,充分清洗酶標(biāo)板 次,用吸水紙*拍干,。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 液 50ul 后,,再加入顯色劑 液 50ul
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,,加入 50ul 終止液。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,,避免交叉污染。
2. 加樣:加樣時(shí),,要控制加樣速度,,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行,。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高,,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,試用幾個(gè)標(biāo)本),,如果對(duì)本試劑盒有任何疑問,可和所購(gòu)經(jīng)銷商,, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液。一旦接觸到這些液體,,請(qǐng)盡快用水沖洗,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。

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TQ2 CPGTide Quencher 2 CPG [TQ2 CPG] 500

無水鈣(2.5KGCalcium Chloride,, Anhydrous,, CAS# 10043-52-4 96%

七水硫鎂(1KGMagnesium Sulfate,, 7H2O,, CAS# 10034-99-8 98%

蔗糖(500GMSucrose,, CAS# 57-50-1

CytoCalcein 紫羅蘭500 450nm處激發(fā)CytoCalcein Violet 500 Excited at 405 nm

7-甲氧基香豆素-4-乙,, 琥珀酰亞胺酯MCA succinimidyl ester [7-Methoxycoumarin-4-acetic acid succinimidyl ester]

N-FMOC-乙二胺N-FMOC-cadaverine

7-羥基吩惡嗪酮乙(乙氧基試鹵靈)Resorufin ethyl ether

鈣離子熒光探針腔腸素 n 超級(jí)純Coelenterazine n UltraPure grade

trFluor Tb琥珀酰SEtrFluor Tb succinimidyl ester

DiSBAC30111DiSBAC30111

Texas Red疊氮化物Texas Red azide

MycoLight Green JJ98[綠色熒光核染料]MycoLight Green JJ98

HC-030031 50 mg1,,2,,36-tetrahydro-1,,3-dimethyl-N-[4-1-methylethylphenyl]-2,,6-dioxo-7H-purine-7-acetamide,; HC-030031

25H-NBOMe imine analog 5 mg)(E-2-25-dimethoxyphenyl-N-2-methoxybenzylideneethanamine,; 25H-NBOMe imine analog

GSK264220A 25 mgN-[2-methyl-5-1-piperidinylsulfonyl-3-furanyl]-N-phenyl-urea,; GSK264220A

Tenovin-1 10 mgN-[[[4-acetylaminophenyl]amino]thioxomethyl-4-11-dimethylethyl]-benzamide,; Tenovin-1

小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒操作步驟Gefitinib 1 gN-3-chloro-4-fluorophenyl-7-methoxy-6-[3-4-morpholinylpropoxy]-4-quinazolinamine,; ZD1839|Iressa

thio-m-Toluthioamide 5 g3-methyl-benzenecarbothioamide 3-Methylbenzenethioamide,; thio-m-Toluthioamide

Bisindolylmaleimide IV 1 mg3,,4-di-1H-indol-3-yl-1H-pyrrole-25-dione,; Arcyriarubin A|BIM IV,; Bisindolylmaleimide IV

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