產(chǎn)品屬性：

名稱    大鼠腮腺細胞
2.組織來源：腮腺組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

大鼠腮腺細胞分離自腮腺組織；腮腺是哺乳類動物口腔中位于下頜角處的最大唾液腺，位于外耳道的前下方,，下頜后窩內(nèi)及下頜支的深面,。腮腺也是某些無尾目動物頸部有毒皮膚腺的聚集體；唾液腺有3對,，腮腺、舌下腺和頜下腺，其中最大的一對是腮腺,。腮腺細胞是高度分化的上皮源性細胞，是一種營養(yǎng)需要復雜,、在一般合成培養(yǎng)基中不易生長,，體外培養(yǎng)比較困難。目前,，DMEM培養(yǎng)液被認為較適于腺細胞的培養(yǎng),。加入一定量的血清更有利于細胞的生長、增殖與分化,。另外,，接種的細胞密度也是培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素之一，尤其是在腺細胞這種單層細胞培養(yǎng)時,，接種的細胞總數(shù)量和生長基質(zhì)表面的細胞密度對整個細胞的生長均有影響,。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠腮腺細胞采用膠原酶-聯(lián)合消化后差速貼壁，結(jié)合上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠腮腺細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形,、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液,，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細胞,，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻,，DMSO 終濃度為 10%,，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,，注意凍 存管做好標識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱,，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
實驗報告：
產(chǎn)品僅用于科研一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
紅曲霉   嗜熱乳酸鏈球菌

鹿皮色曲霉   紅法夫酵母

甲型副傷寒沙門菌凍干粉   南方樹舌

氧化微桿菌   多主枝孢

居海洛克氏菌   白色念珠菌凍干粉
大鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)elisa檢測試劑盒

大鼠谷氨酰胺合成酶(GS)elisa檢測試劑盒

大鼠脫羧酶2(GAD2)elisa檢測試劑盒

大鼠脫氫酶(GDH)elisa檢測試劑盒

大鼠半連接酶催化亞基(GCLC)elisa檢測試劑盒
大鼠腮腺細胞貓生長激素(GH)elisa分析檢測試劑盒

貓嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)elisa分析檢測試劑盒

貓?zhí)妓狒?/span>9(CA9)elisa分析檢測試劑盒

貓血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)elisa分析檢測試劑盒

貓游離甲狀腺素(FT4)elisa分析檢測試劑盒