培養(yǎng)操作：
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細胞變圓 脫 落后,，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,，輕輕混勻,，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml,，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80 度冰箱,，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

產品屬性：

名稱    小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞
2.組織來源：肺組織

3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞分離自肺組織,；肺泡由單層上皮細胞構成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經多次反復分枝成無數(shù)細支氣管,，它們的末端膨大成囊,，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡,。小肺泡細胞,，又稱I型肺泡細胞，厚約0.1微米,，基底部是基底膜,，無增殖能力。大肺泡細胞,，又稱Ⅱ型肺泡細胞,，分泌表面活性物質（二棕櫚酰），以降低肺泡表面張力,。Ⅱ型肺泡細胞位于Ⅰ型肺泡細胞之間,，數(shù)量較Ⅰ型肺泡細胞多，但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細胞小,。細胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔,。細胞核圓形，胞質著色淺,、呈泡沫狀,。電鏡下，細胞游離而有少量微絨毛,，胞質內富含線粒體和溶酶體,，有較發(fā)達的粗面內質網和高爾基復合體。核上方有較多的分泌顆粒,，電子密度高,、大小不等，直徑約0.1-1.0μm顆粒內含有平行排列的板層狀結構,，稱為嗜餓性板層小體,。小體內的主要成分為磷脂，以二棕櫚酰為主,，此外還有糖胺多糖及蛋白質等,。顆粒內物質釋放出來后，在肺泡表面形成一層粘液層,，稱為表面活性物質（surfactant）,。表面活性物質有降低肺泡表面張力、穩(wěn)定肺泡大小的作用,。呼氣時肺泡縮小,，表面活性物質密度增加，表面張力降低,，防止肺泡過度塌陷,；吸氣時肺泡擴張，表面活性物質密度減小,，肺泡回縮力加大,，可防止肺泡過度膨脹。表面活性物質的缺乏或變性均可引起肺不張,，過度通氣可造成表面活性物質缺乏,；吸入毒氣可直接破壞表面活性物質。Ⅱ型肺泡細胞有分裂,、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細胞的潛能,，故具有修復受損傷上皮的作用。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞采用彈性蛋白酶灌注消化法結合差速貼壁法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞經SP-C免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

實驗報告：
產品僅用于科研一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5,、PBS沖洗細胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基90mm   糞腸球菌ATCC51299凍干粉

指狀青霉   玫瑰褐鏈霉菌

蘇云金芽胞桿菌托馬諾夫亞種 Bacillus thuringiensis subsp. toumanoffii   青枯假單胞菌

赭曲霉   赭曲霉

孔雀石綠鏈霉菌   蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種Bacillusthuringeinsissubsp.thuringeinsis
大鼠大內皮素1elisa檢測試劑盒

大鼠催乳素(PRL)elisa檢測試劑盒

大鼠催產素(OT)elisa檢測試劑盒免費代測

大鼠促胰液素/胰泌素(Sct)elisa檢測試劑盒

大鼠促性腺激素抑制激素(GnIH)elisa檢測試劑盒
小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞琥珀酸含量試劑盒

琥珀酸脫氫酶（SDH)測試盒

琥珀酸脫氫酶SDH測試盒 50管/48樣 比色法

花青素還原酶（ANR）測試盒

花生酸（C20:0）含量測試盒

冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。