名稱    胰腺星狀細胞
2.組織來源：胰腺組織

3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

人胰腺星狀細胞分離自胰腺組織,；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分,。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液,，腺管是胰液排出的通道,。胰液中含有碳酸氫鈉、原,、脂肪酶,、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,，有消化蛋白質,、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,，胰島主要由4種細胞組成：α細胞,、β細胞、γ細胞及PP細胞,。α細胞分泌胰高血糖素,，升高血糖；β細胞分泌胰島素,，降低血糖,；γ細胞分泌生長抑素,，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌,；PP細胞分泌胰多肽,，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮,。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,，活化的胰腺星狀細胞（PSC）是胰腺纖維化的主要效應細胞，PSC分離和成功培養(yǎng)是體外研究胰腺纖維化的重要前提,。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,，并表達Desmin蛋白，活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白（alpha-SMA）,。PSC具有靜息態(tài)與激活態(tài)兩種,，并分別具有特異的標志物。靜息狀態(tài)PSC胞質內富含的A脂滴可以被油紅O染成紅色,，陽性表達Desmin,。激活狀態(tài)PSC陽性表達alpha-SMA。油紅O染色發(fā)現(xiàn),，原代分離的細胞培養(yǎng)6d,，胞漿中仍可見明顯的脂滴，傳代后,，橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失,。免疫細胞化學染色顯示，細胞接種24h仍然表達Desmin,，48h后Desmin基本不再表達,。培養(yǎng)48h后絕大多數細胞開始表達alpha-SMA，隨著培養(yǎng)時間的增長和傳代次數的增加,，細胞表達alpha-SMA,，而不再表達Desmin，說明細胞活化,。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程,，至培養(yǎng)第6d大多數細胞激活，傳代后細胞處于高度激活狀態(tài),。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型,，目前研究發(fā)現(xiàn)：胰腺受損時，在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化,，導致細胞形態(tài),、功能發(fā)生變化，促使基質增生、膠原蛋白的大量生成及不規(guī)則沉積,。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的人胰腺星狀細胞采用膠原酶制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

公司實驗室分離的人胰腺星狀細胞經α-SMA,、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
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細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài),、結構,、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學的條件,，可以根據實際需要進行人為的控制,，同時，可以施加化學,、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數后,，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備,。

使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精消毒，拆下封口膜,，放入37℃,，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號21875-091)，90%,；優(yōu)質胎牛血清，10%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

環(huán)狀芽孢桿菌   釀酒酵母  甘蔗糖蜜羅母酒；利用亞法進行甘油發(fā)酵

嗜鹽四聯(lián)球菌   木糖氧化產堿菌木糖氧化亞種

琥珀毛殼   粉狀畢赤酵母

植物乳桿菌   橢圓釀酒酵母

羅斯酵母   膠紅酵母
大鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)elisa檢測試劑盒

大鼠花生四烯酸(AA)elisa檢測試劑盒

大鼠紅細胞生成素受體(EPOR)elisa檢測試劑盒

大鼠紅細胞生成素(EPO)elisa檢測試劑盒

大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(sm Actinin-α)elisa檢測試劑盒
胰腺星狀細胞牛心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)elisa分析檢測試劑盒

牛心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)elisa分析檢測試劑盒

牛鋅金屬硫蛋白(Zn-MT)elisa分析檢測試劑盒

牛新包蟲抗體elisa分析檢測試劑盒

牛雄烯二酮(ASD)elisa分析檢測試劑盒