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當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 兔主動脈平滑肌細胞
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌R&D/美國
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2022-04-11 09:20:36瀏覽次數(shù):195次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
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貨號 | GOY-01X0804 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
我司全程提供細胞生物體,、生長特性,、來源、器官,、類型,、形態(tài)、培養(yǎng)條件,、應用,、組織,、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,,我們專業(yè)您的細胞系實驗,讓您實驗再無煩擾,!產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0804 |
名稱 兔主動脈平滑肌細胞
2.組織來源:主動脈組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
兔主動脈平滑肌細胞分離自主動脈組織,;主動脈是體循環(huán)的動脈主干。其運行路徑為:升主動脈起于左心室,,至右側(cè)第2胸肋關節(jié)高度移行為主動脈弓,,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈;在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈,,以上為胸主動脈,,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈,;髂總動脈在骶髂關節(jié)高度分為髂內(nèi),、外動脈,。主動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,,細胞形態(tài)大小不一,,呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形、居中,;2周后細胞匯合,,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏,;細胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點,。主動脈平滑肌細胞在心血管疾病發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用,,以主動脈平滑肌細胞為實驗研究對象,,探討心血管疾病相關發(fā)病機制是目前研究的熱點;體外培養(yǎng)的主動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
5.方法簡介:
公司實驗室分離的兔主動脈平滑肌細胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
6.質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的兔主動脈平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,,包括活細胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu)、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,,同時,,可以施加化學、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細胞術、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備,。
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,,75%酒精消毒,,拆下封口膜,放入37℃,,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,,37℃溫浴3min左右,;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,,再加入*培養(yǎng)液終止消化,;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
4) 待細胞*貼壁后,,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
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細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,,貨號21875-091),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
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