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更新時間:2017-03-09 14:19:37瀏覽次數(shù):232次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)人補體蛋白3(C3)elisa試劑盒實驗方法 英文名稱:Human Complement 3,C3 ELISA Kit 檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,,重復性好的實驗方法,。其試劑穩(wěn)定、易保存,,操作簡便,。凡購買本公司試劑盒非人為質量問題,收貨后十五個工作日內包退換,。
英文名稱:Human Complement 3,C3 ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實驗試劑,,不得用于臨床診斷。
標本:血清,、血漿,、細胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
種屬:人,、大鼠、小鼠,、兔子,、豬、犬、猴,、馬,、牛、羊,、雞,、鴨、魚等,。
人補體蛋白3(C3)elisa試劑盒實驗方法實驗材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標儀(使用前預熱30分鐘),,微量加液器、吸頭,、蒸餾水或去離子水,,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,,如果樣品量不夠或者不確定,,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,,靜置1小時備用(如果標本是血清或者血漿,,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用,。
人補體蛋白3(C3)elisa試劑盒實驗方法樣品收集,、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,,調整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右,,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,,或 者細胞超聲粉碎,,離心取上清液檢測。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,,以1000×g離心15分鐘,取上清待測,。
4. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清,。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,分泌物等,。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,,加入500ul 的PBS,,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,,-70 ℃保存,,避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應再次離心,。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
人補體蛋白3(C3)elisa試劑盒實驗方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),,把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準 品組(6 個濃度),、空白孔,、待測樣品組。 注:為減少實驗誤差,,保證準確性,,建議設置復孔。
3. 加樣:依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中,;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水,;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液(空白對照孔除外),。
5. 溫育:酶標板用封板紙密封后,,放入濕盒內于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,,靜置 15-30s,,充分清洗酶標板 5 次,用吸水紙*拍干,。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,,再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止:25-37℃下避光反應 10-15 分鐘,,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。
注意事項:
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭,,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時,要控制加樣速度,,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響 實驗的準確性以及重復性,。
3. 孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行,。
4. 反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應,。
5. 建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,,應對樣品進行稀釋,,計算結果時乘以相應的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,,試用幾個標本),,如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經銷商,, 如果因運輸過程導致試劑盒失效,,可要求調換,但概不承擔產品本身以外的任何損失,。
人補體蛋白3(C3)elisa試劑盒實驗方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液。一旦接觸到這些液體,,請盡快用水沖洗,。
2. 實驗中不要進食,、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
CTLA-4/CD152 細胞毒性T細胞抗原-4抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗大鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-rat IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗大鼠IgM規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-pig IgG/PE PE標記的兔抗豬IgG規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的驢抗豚鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
HPR 結合珠蛋白相關蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
CD14 內毒素受體抗體規(guī)格: 0.1ml
CD168/RHAMM 透明質酸介導細胞游走受體抗體規(guī)格: 0.1ml
CD172a/SIRP Alpha 信號調節(jié)蛋白α抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgM 兔抗雞IgM規(guī)格: 0.2ml
CDKL3/NKIAMRE 細胞周期蛋白依賴性激酶樣3抗體規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的小鼠抗豚鼠IgG規(guī)格: 0.1ml
FABPB 腦型脂肪酸結合蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
TP53TG3 p53靶蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml
PSMD10/Proteasome 26S S10 蛋白酶調解因子10抗體規(guī)格: 0.2ml
CASPR/Neurexin4 軸突蛋白4/少突膠質細胞抗體規(guī)格: 0.2ml
Galectin 8 半糖凝集素8抗體規(guī)格: 0.2ml
CD46/MCP (human) 膜輔蛋白抗體(人)規(guī)格: 0.2ml熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
雞油菌 Cantharellus cibarius
小鼠外周血白細胞*培養(yǎng)基100mL
人膀胱成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum
大腸桿菌 Escherichia coli
293E(人胚腎細胞(EBNA1基因修飾))5×106cells/瓶×2
串珠菌 Leuconostoc lactis
豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum
MDA-MB-231, 人腺細胞gersion
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
5637, 人膀胱細胞
屎腸球菌 Enterococcus faecium
香菇 Lentinula edodes
CNE-2Z(人鼻咽細胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
鏈霉菌 Streptomyces sp.
人胚肺成纖維細胞英文名稱:MRC-5
rCF, 大鼠心臟成纖維細胞
產朊假絲酵母 Candida utilis
鏈霉菌 Streptomyces sp.
Anglne(人卵巢細胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
翠綠綠僵菌 Metarhizium iadini
人肝細胞英文名稱:Bel-7402
人補體蛋白3(C3)elisa試劑盒實驗方法K-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細胞 Human
鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
SF763(人腦瘤細胞)5×106cells/瓶×2
溝腸桿菌 Enterobacter cloacae
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