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人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

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品       牌R&D/美國(guó)

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-03-09 14:14:03瀏覽次數(shù):182次

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用途:本試劑盒僅供科研使用,,定量檢測(cè)細(xì)胞液,、體液,、組織、血清,、血漿等標(biāo)本人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法的含量,。

人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱(chēng):Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法,。其試劑穩(wěn)定、易保存,,操作簡(jiǎn)便,。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。
英文名稱(chēng):Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit   
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清,、血漿,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
種屬:人,、大鼠、小鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬,、牛、羊,、雞,、鴨、魚(yú)等,。
11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),,微量加液器、吸頭,、蒸餾水或去離子水,,濾紙。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,,如果樣品量不夠或者不確定,,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,,此步驟忽略)。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用,。
11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集,、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,,通過(guò)反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,,或 者細(xì)胞超聲粉碎,,離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè),。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清,。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,,稱(chēng)取重量0.5mg,加入500ul PBS,,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進(jìn)行檢測(cè),。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),,應(yīng)將其分裝,,-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心,。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),,把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度),、空白孔,、待測(cè)樣品組。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,,保證準(zhǔn)確性,,建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水,;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外),。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí)。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿(mǎn)每孔,,靜置 15-30s,,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,用吸水紙*拍干,。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 50ul 后,,再加入顯色劑 B 50ul
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值。 
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行,。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高,,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)?jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),試用幾個(gè)標(biāo)本),,如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),,可和所購(gòu)經(jīng)銷(xiāo)商, 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,,可要求調(diào)換,,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。
11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑A,、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗,。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食,、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

TXNDC5  硫氧還蛋白5抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-RACGAP1(Ser387)  磷酸化Rho GTP酶激活蛋白GAP抗體規(guī)格: 0.1ml

CEP76  中心體蛋白質(zhì)76抗體規(guī)格: 0.2ml

Cyclin J  周期素J抗體規(guī)格: 0.2ml

CLK3  細(xì)胞分裂周期樣激酶3抗體規(guī)格: 0.2ml

IRS P53  胰島素受體底物p53蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

Integrin β1/CD29  整合素β1抗體規(guī)格: 0.1ml

JNK3/MAPK10  氨基末端激酶3抗體規(guī)格: 0.1ml

Legumain  半胱氨酸蛋白酶抗體規(guī)格: 0.2ml

IFI78/MX1  干擾素誘導(dǎo)蛋白P78抗體規(guī)格: 0.1ml

ELOVL2  鏈脂肪酸延酶ELOVL2抗體規(guī)格: 0.2ml

Noxa  Noxa蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

CD239  B細(xì)胞粘附分子CD239抗體規(guī)格: 0.2ml

AGPB/Alpha 1 acid glycoprotein 2  α1酸性糖蛋白2抗體(類(lèi)粘蛋白2)規(guī)格: 0.2ml

Phospho-Histone H3(Ser28)  磷酸化組蛋白H3抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-HDAC1(Ser423)  磷酸化組蛋白去乙?;?/span>1抗體規(guī)格: 0.1ml

Hexokinase 1  己糖激酶1抗體規(guī)格: 0.2ml

Cytochrome B/MT-CYB  細(xì)胞色素B抗體規(guī)格: 0.2ml

IFNAR1  干擾素α受體抗體規(guī)格: 0.1ml

M-RAS/Mras  原基因M-ras抗體規(guī)格: 0.1ml

MSH2  錯(cuò)配修復(fù)蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml

NLK/Nemo-like kinase  Nemo樣激酶抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-NF1(Ser2817)  磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體規(guī)格: 0.1ml

APC6/CDC16  細(xì)胞分裂周期蛋白16抗體規(guī)格: 0.2ml

ZWINT  著絲粒ZW10相互作用蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

PPHLN1  脈周蛋白1抗體(胃抗原蛋白Ga50)規(guī)格: 0.2ml威爾酵母 Saccharomyces willianus

香菇 Lentinula edodes

BC-019(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

NCI-H661(人大細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

醋酸鈣不動(dòng)桿菌 Acinetobacter calcoaceticus

大鼠骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

鞘氨醇桿菌屬 Sphingobacterium sp.

黑曲霉 Aspergillus niger

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法RF/6A(猴視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

桿菌屬 Lactobacillus sp.

根瘤菌

Tris-Glycine SDS500ml國(guó)產(chǎn)

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

玉米孢霉

枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis

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