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人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌R&D/美國(guó)

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-03-09 14:11:23瀏覽次數(shù):178次

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用途:本試劑盒僅供科研使用,,定量檢測(cè)細(xì)胞液,、體液,、組織,、血清,、血漿等標(biāo)本人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法的含量,。

人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱:Human lupus anticoagulant,LAC/LA ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法,。其試劑穩(wěn)定,、易保存,操作簡(jiǎn)便,。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱:Human lupus anticoagulant,LAC/LA ELISA Kit   
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,,不得用于臨床診斷,。
標(biāo)本:血清、血漿,、細(xì)胞上清液,、尿液、體液,、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水,、組織等,。
種屬:人、大鼠,、小鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛,、羊、雞,、鴨,、魚等。
人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),,微量加液器,、吸頭、蒸餾水或去離子水,,濾紙,。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集,、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,,通過(guò)反復(fù)凍融,,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,,離心取上清液檢測(cè),。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測(cè),。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清,。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,分泌物等,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,,收集上清進(jìn)行檢測(cè),。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性,。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,,避免反復(fù)冷凍,。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心,。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),,把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度),、空白孔、待測(cè)樣品組,。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本,。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí),。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 50ul 后,,再加入顯色劑 B 50ul,。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時(shí),,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說(shuō)明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行,。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),,可和所購(gòu)經(jīng)銷商,, 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑AB和終止液,。一旦接觸到這些液體,,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食,、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

PDE4D  磷酸二酯酶4D抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr771)  磷酸化小板源性生因子受體-B抗體規(guī)格: 0.1ml

Filamin A/FLNA  細(xì)絲蛋白A抗體規(guī)格: 0.2ml

FAM113A  FAM113A蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

FRMD1  FRMD1蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

PANK4  泛酸激酶4抗體規(guī)格: 0.2ml

GIMAP5  GTPIMAP家族成員5抗體規(guī)格: 0.2ml

ANKRD40  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體規(guī)格: 0.2ml

TSPAN10/Oculospanin  四分子交聯(lián)體10抗體(四旋蛋白)規(guī)格: 0.2ml

EKLF/KLF1, 2, 4  上皮鋅指蛋白1, 2, 4抗體規(guī)格: 0.2ml

FRG2B  FRG2B蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Rad52  Rad52抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-c-Raf(Ser43)  磷酸化原基因c-Raf抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-Rb (Ser807/Ser811)  磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml

Secretin  分泌素抗體規(guī)格: 0.1ml

ATAD5  染色體脆弱性相關(guān)基因抗體規(guī)格: 0.2ml

CLRN3/TMEM12  跨膜蛋白12抗體規(guī)格: 0.2ml

AKAP2  蛋白激酶A2抗體規(guī)格: 0.2ml

UBR2  泛素蛋白連接酶E3α2抗體規(guī)格: 0.2ml

MAP3K5/ASK1/MEKK5  細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體規(guī)格: 0.1ml

Proteasome 20S beta 7  蛋白酶體PSMβ7抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-NFKB p65(Thr435)  磷酸化細(xì)胞核因子抗體規(guī)格: 0.1ml

COX7A2  細(xì)胞色素c氧化酶7A2抗體規(guī)格: 0.1ml CEM/C1(人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

酒假絲酵母 Candida kefyr

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

MG-63, 人骨肉瘤細(xì)胞gersion

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

青霉菌 Penicillium sp

人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

普通變形菌 Proteus vulgaris

密紋靈芝,,泰山靈芝 Ganoderma tenus

結(jié)晶紫染色液規(guī)格:100ml

大鼠胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

屎腸球菌 Enterococcus faecium

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

NCI-H226(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

桿菌屬 Lactobacillus sp.

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法大豆慢生根瘤菌

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

HT-1080(人纖維肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

酸克魯維酵母 Kluyveromyces lactis

苜蓿中華根瘤菌

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