人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱：Human Abnormal prothrombin,APT ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,，特異性強(qiáng),，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,，操作簡便,。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。 
英文名稱：Human Abnormal prothrombin,APT ELISA Kit 
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實(shí)驗(yàn)試劑,，不得用于臨床診斷。
標(biāo)本：血清,、血漿,、細(xì)胞上清液、尿液,、體液,、灌洗液、腦脊髓,、心房水,、胸房水、組織等,。
種屬：人,、大鼠、小鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛,、羊,、雞、鴨,、魚等,。
人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器,、吸頭,、蒸餾水或去離子水，濾紙,。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定,，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻，靜置1小時(shí)備用（如果標(biāo)本是血清或者血漿,，此步驟忽略）,。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用,。
人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無菌管收集細(xì)胞上清液,，以1000×g離心15分鐘，收集上清,。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右，通過反復(fù)凍融,，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,，或 者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測,。
3. 血清：在室溫下,，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘,，取上清待測,。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后,，以1000×g離心15分鐘,，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水,、腦脊液,，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,，以1000×g離心15分鐘,，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本,，稱取重量0.5mg,，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器,，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測,，應(yīng)將其分裝,，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心,。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,，檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟：
1. 取出試劑盒,，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板,，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組（6 個(gè)濃度）,、空白孔,、待測樣品組。 注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差,，保證準(zhǔn)確性,，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水,；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液（空白對照孔除外）,。
5. 溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí),。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔,，靜置 15-30s，充分清洗酶標(biāo)板 5 次,，用吸水紙*拍干,。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul,。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項(xiàng)：
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時(shí),，要控制加樣速度,，避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,，從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育：嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,，如果顏色較深,，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,，如樣品濃度過高,，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)（即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，試用幾個(gè)標(biāo)本），如果對本試劑盒有任何疑問,，可和所購經(jīng)銷商,， 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換,，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液,。一旦接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗。
2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食,、抽煙或使用化妝品,。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

FUCA1/Alpha L fucosidase I  α-L巖藻糖苷酶抗體 0.2ml

HBcAg(1H8)  人乙型肝炎核心抗原單克隆抗體規(guī)格: 0.1ml

Slc22a5  溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-Tau protein(Thr205)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

CCDC30  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白30抗體規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-human IgM/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的羊抗人IgM規(guī)格: 0.1ml

Lactoferrin  鐵蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

O-GlcNAc transferase  O位N-乙酰葡萄糖胺OGT抗體規(guī)格: 0.2ml

RBBP5  視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白5抗體規(guī)格: 0.2ml

KIF20A/MKLP2  有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣2抗體規(guī)格: 0.2ml

SIP1/ZEB-2  運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元存活蛋白結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-BAD(Ser75)  磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體規(guī)格: 0.1ml

phospho-ADRB2 (Ser261)  磷酸化上素能受體β2抗體規(guī)格: 0.1ml

IL-17B  白介素-17B抗體規(guī)格: 0.1ml

WWP1  WW結(jié)構(gòu)域E3泛素連接酶1抗體規(guī)格: 0.2ml

CD10/MME/Neprilysin  金屬肽鏈內(nèi)切酶抗體規(guī)格: 0.1ml

NDUFV2  NADH脫氫酶黃素蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml

APG5L/ATG5  自噬蛋白5/細(xì)胞凋亡的特異性蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

Myoglobin  肌紅蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

TCF12/HEB  轉(zhuǎn)錄因子12抗體規(guī)格: 0.2ml

CTAG1B/Cancer/testis antigen 1  瘤/睪抗原1B 0.2ml瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus

刺孢吸水鏈霉菌 Streptomyces hygrospinosus

大鼠腎系膜細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

A875(人黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

酒假絲酵母 Candida kefyr

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元gersion

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

栗色渾圓鏈霉菌 Streptomyces castaneoglobosus

人膽囊細(xì)胞英文名稱：GBC-SD

葡枝根霉 Rhizopus stolonifer

貝葉多孔菌

Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格：20次

大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

伯頓擬內(nèi)孢霉 Endomycopsis burtonii

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

NCI-H2452(人間皮瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

粉孢 Oidium lactis

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

NCI-N87(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

人異常凝血酶原(APT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法宋內(nèi)氏志賀氏菌 Shigella sonnei

始旋鏈霉菌 Streptomyces pristinaespiralis

人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

漢遜德巴利酵母 Aspergillus restrictus