名稱    直腸平滑肌細(xì)胞
2.組織來源：直腸組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

人直腸平滑肌細(xì)胞分離自直腸組織；直腸為大腸的未段,，位于小骨盆內(nèi),。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸，沿骶骨和尾骨的前面下行,，穿過盆膈,，下端以而終。直腸上端的大小似結(jié)腸,，其下端擴(kuò)大成直腸壺腹,，是糞便排出前的暫存部位，下端變細(xì)接,。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關(guān)系密切,，與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪,、無縱帶,，位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏,；細(xì)胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀；密度高時,，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈，來自髂內(nèi)動脈的直腸中動脈和來自髂內(nèi)動脈的直腸下動脈,。平滑肌收縮是胃腸蠕動中基本的運(yùn)動方式,；腸炎時由于平滑肌特殊肌動蛋白的增加導(dǎo)致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生,，這進(jìn)一步證明了炎癥時的腸平滑肌細(xì)胞具有可塑性,。利用腸平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)，可以幫助了解收縮,、增殖和胃腸道結(jié)締組織對平滑肌細(xì)胞的反應(yīng),。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的人直腸平滑肌細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人直腸平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
我司全程提供細(xì)胞生物體,、生長特性、來源,、器官,、類型、形態(tài),、培養(yǎng)條件,、應(yīng)用、組織,、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說明書信息,，我們專業(yè)您的細(xì)胞系實驗，讓您實驗再無煩擾,！產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中,，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制,，同時，可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。

使用方法：
收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精消毒,，拆下封口膜，放入37℃,，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右,；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細(xì)胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號21875-091)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

酵母蛋白酶抑制劑1mL  PAGE 膠長加樣槍頭1盒

His 標(biāo)簽蛋白專用蛋白酶抑制劑10mL  Paclitaxel(TAXOL)(  )100μL

組織培養(yǎng)基蛋白酶抑制劑1mL  OrigamiB(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞10×100μL

α2巨球蛋白25Inh.U  Origami(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞0.1mL×10

AEBSF 溶液，10mg/mL5mL  Origami B(DE3)plysS 感受態(tài)細(xì)胞 0.1mL×10
大鼠抗凝血酶III(AT III)elisa檢測試劑盒

大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)elisa檢測試劑盒

大鼠抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)elisa檢測試劑盒

大鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)elisa檢測試劑盒

大鼠抗利尿激素/血管加壓素/加壓素(ADH/VP/AVP)elisa檢測試劑盒
直腸平滑肌細(xì)胞人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)elisa分析檢測試劑盒

人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)elisa檢測試劑盒

人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)elisa分析檢測試劑盒

人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)elisa檢測試劑盒

人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)elisa分析檢測試劑盒