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人優(yōu)球蛋白(EL)elisa試劑盒操作步驟

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌R&D/美國(guó)

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-03-09 13:33:34瀏覽次數(shù):238次

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用途:本試劑盒僅供科研使用,,定量檢測(cè)細(xì)胞液,、體液,、組織,、血清,、血漿等標(biāo)本人優(yōu)球蛋白(EL)elisa試劑盒操作步驟的含量。

人優(yōu)球蛋白(EL)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱:Human EuglobulinLysis,EL ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,操作簡(jiǎn)便,。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱:Human EuglobulinLysis,EL ELISA Kit 
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測(cè)定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,,不得用于臨床診斷,。
標(biāo)本:血清、血漿,、細(xì)胞上清液,、尿液、體液,、灌洗液,、腦脊髓、心房水,、胸房水,、組織等,。
種屬:人、大鼠,、小鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛,、羊、雞,、鴨,、魚等。
人優(yōu)球蛋白(EL)elisa試劑盒操作步驟實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),,微量加液器,、吸頭、蒸餾水或去離子水,,濾紙,。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
人優(yōu)球蛋白(EL)elisa試劑盒操作步驟樣品收集,、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,,收集上清,。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,,通過(guò)反復(fù)凍融,,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或 者細(xì)胞超聲粉碎,,離心取上清液檢測(cè),。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測(cè),。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,,稱取重量0.5mg,,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè),。
7. 樣品中不能含有NaN3,,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),,應(yīng)將其分裝,,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍,。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中含大量顆粒,,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人優(yōu)球蛋白(EL)elisa試劑盒操作步驟操作步驟:
1. 取出試劑盒,,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),,把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組,。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,;空白對(duì)照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測(cè)樣本,。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測(cè)樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對(duì)照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí),。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 50ul 后,,再加入顯色劑 B 50ul,。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長(zhǎng)讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時(shí),,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說(shuō)明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行,。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),,如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),,可和所購(gòu)經(jīng)銷商, 如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
人優(yōu)球蛋白(EL)elisa試劑盒操作步驟安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑AB和終止液,。一旦接觸到這些液體,,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食,、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

hospho-MBP(Tyr203)  磷酸化髓鞘堿性蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

LCA/Lens culinaris agglutinin  扁豆凝集素規(guī)格: 0.2ml

PEG10  肝高表達(dá)基因抗體規(guī)格: 0.1ml

C12ORF50  12號(hào)染色體開放閱讀框50抗體規(guī)格: 0.2ml

Donkey Anti-Goat IgG/RBITC  羅丹明標(biāo)記的驢抗羊IgG規(guī)格: 0.1ml

GM-CSF  粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞克隆刺激因子抗體規(guī)格: 0.1ml

CD66c/CEACAM6  胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子抗體規(guī)格: 0.2ml

KCNC1  離子通道蛋白Kv3.1抗體規(guī)格: 0.1ml

PDZK1  PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK1蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgG規(guī)格: 0.1ml

Claudin 5  緊密連接蛋白5抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗猴IgM規(guī)格: 0.1ml

RAD54B  DNA修復(fù)和重組蛋白RAD54B抗體規(guī)格: 0.2ml

CLASP1  細(xì)胞連接相關(guān)蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

RGS2  G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體規(guī)格: 0.1ml

CHMP4B/CHMP4C  染色質(zhì)修飾蛋白4B(4C)抗體規(guī)格: 0.2ml

WNT10A  信號(hào)通路WNT10A抗體規(guī)格: 0.1ml

CLIP1/CLIP170  細(xì)胞質(zhì)連接蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

BCAT1  胞漿支鏈氨基酸酸轉(zhuǎn)氨酶抗體規(guī)格: 0.1ml

MIP-1 Beta/CCL4  巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗體 MIP-1β規(guī)格: 0.1ml

EphA6/Eph receptor A6  酪氨酸蛋白激酶受體A6抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-PKC delta (Tyr52)  磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-PLK1 (Ser137)  磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體規(guī)格: 0.1ml

PCDH20  原鈣粘附蛋白20抗體規(guī)格: 0.2ml

ABCG4  ABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 0.1ml毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

田菁根瘤菌 Azorhizobium caulinodans

A9(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

雅致小克銀漢霉 Cunninghamella elegans

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

PC-3M(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion

粘質(zhì)沙雷氏菌 Serratia marcescens

黑木耳 Auricularia auricula

植物蛋白提取試劑(帶酶抑制劑)100次國(guó)產(chǎn)

小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

葡萄牙假絲酵母 Candida lusitaniae

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

Multi-tagged Protein Lysate/多標(biāo)簽蛋白裂解液20μg國(guó)產(chǎn)gersion

少孢根霉 Rhizopus oligosporus

絲蓋小苞腳菇 Volvariella bombycina

小鼠卵巢上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

大鼠腎小管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

土曲霉 Aspergillus terreus

黑化鏈霉菌 Streptomyces nigrificans

L1210(小鼠白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

嗜鞣管囊酵母 Pachysolen tannophilus

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

人優(yōu)球蛋白(EL)elisa試劑盒操作步驟人腺細(xì)胞英文名稱:Hs 578T

GC-1, 鼠原細(xì)胞 Mouse

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

鐮刀菌 Fusarium sp.

胰蛋白酶(10mL 酶解緩沖液)1mL

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