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人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

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產(chǎn)品型號

品       牌R&D/美國

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-03-09 12:57:22瀏覽次數(shù):208次

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用途:本試劑盒僅供科研使用,,定量檢測細(xì)胞液,、體液、組織,、血清,、血漿等標(biāo)本人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法的含量。

人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱:Human Prothrombin,PT ELISA Kit      檢測方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,操作簡便,。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。 
英文名稱:Human Prothrombin,PT ELISA Kit    
規(guī)格:96T/48T
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀:盒裝液體
人白介素2受體(IL-2R)Elisa測定試劑盒用途:科研與實(shí)驗(yàn)試劑,不得用于臨床診斷,。
標(biāo)本:血清,、血漿、細(xì)胞上清液,、尿液,、體液、灌洗液,、腦脊髓,、心房水、胸房水,、組織等,。
種屬:人、大鼠,、小鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛,、羊、雞,、鴨,、魚等。
人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制:
1. 儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),,微量加液器,、吸頭、蒸餾水或去離子水,,濾紙,。
2. 緩沖液使用:加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,如果樣品量不夠或者不確定,,緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可,。 混勻,靜置1小時(shí)備用(如果標(biāo)本是血清或者血漿,,此步驟忽略),。
3. 洗液的配制:按1:100的比例配制洗液備用。
人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份,。用無菌管收集細(xì)胞上清液,,以1000×g離心15分鐘,收集上清,。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,,或 者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測,。
3. 血清:在室溫下,,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,,取上清待測,。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,,以1000×g離心15分鐘,,收集上 清。
5. 體液:包括胸腹水,、腦脊液,,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,,以1000×g離心15分鐘,,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,,稱取重量0.5mg,,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測,。
7. 樣品中不能含有NaN3,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測,,應(yīng)將其分裝,,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍,。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,,應(yīng)再次離心,。血液標(biāo) 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍,。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1. 取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置 30 分鐘,。
2. 分組:取出 96 孔板,,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理,。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 品組(6 個(gè)濃度),、空白孔、待測樣品組,。 注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔,。
3. 加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入 50ul 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中,;空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水;其余微孔中加入 50ul 的待測樣本,。
4. 加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組,、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標(biāo)溶液(空白對照孔除外)。
5. 溫育:酶標(biāo)板用封板紙密封后,,放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時(shí),。
6. 洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置 15-30s,,充分清洗酶標(biāo)板 5 次,,用吸水紙*拍干。
7. 顯色:各孔加入顯色劑 A 50ul 后,,再加入顯色劑 B 50ul,。
8. 終止:25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,加入 50ul 終止液,。 9. 讀板:在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。 
注意事項(xiàng):
1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染,。
2. 加樣:加樣時(shí),,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時(shí)間間隔過大,,否則將會導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,,從而影響 實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性,。
3. 孵育:嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,,如果顏色較深,,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測樣品含量,,如樣品濃度過高,,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù),。
6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對本試劑盒有任何疑問,,可和所購經(jīng)銷商,, 如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失,。
人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法安全性
1. 避免人體直接接觸顯色劑AB和終止液,。一旦接觸到這些液體,,請盡快用水沖洗。
2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食,、抽煙或使用化妝品,。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

ER-beta  雌激素受體β 抗體規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Monkey IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗猴IgG規(guī)格: 0.1ml

ABHD5  自水解酶結(jié)構(gòu)域5蛋白抗體 0.2ml

CD133  造干細(xì)胞抗原CD133抗體 0.1ml

Calpain 1  鈣蛋白酶1抗體規(guī)格: 0.1ml

TROP2/TACD2  細(xì)胞表面糖蛋白Trop2抗體(胰標(biāo)志物蛋白)規(guī)格: 0.1ml

phospho-KLF5(Ser272)  磷酸化KLF5抗體規(guī)格: 0.1ml

UBAP1  泛素相關(guān)蛋白1抗體(鼻咽相關(guān)基因20蛋白)規(guī)格: 0.2ml

NTCP/SLC10A1  鈉離子/?;悄懰峁厕D(zhuǎn)運(yùn)蛋白規(guī)格: 0.1ml

C20orf160  20號染色體開放閱讀框160抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/AP  堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc規(guī)格: 0.1ml

APBB1/Fe65 protein  鐵蛋白Fe65抗體規(guī)格: 0.1ml

Reg3 beta  胰島β細(xì)胞生因子Reg IIIα 抗體規(guī)格: 0.2ml

IKK beta/IKB  KB抑制蛋白激酶β抗體規(guī)格: 0.1ml

GLB1L3  β半糖苷酶1樣蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml

phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1059)  磷酸化管內(nèi)皮生因子受體2抗體規(guī)格: 0.1ml

KLHDC9  KLHDC9蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-chicken IgM/Gold  膠體金標(biāo)記的兔抗雞IgM規(guī)格: 2ml

EGF  表皮生因子抗體(大鼠)規(guī)格: 0.1ml

DAP3  死亡相關(guān)蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml

PIWIL1/Miwi  piwi1蛋白抗體規(guī)格: 0.1ml

CKLFH8/CMTM8  趨化素樣因子超家族成員8抗體規(guī)格: 0.2ml

TGF Beta R1/TGFBR1  轉(zhuǎn)移生因子β受體1抗體(TGF-βRⅠ)規(guī)格: 0.2ml

CCL11/Eotaxin 1  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

PRUNE/DRES17  相關(guān)蛋白DRES17抗體規(guī)格: 0.2ml

L-enk  亮氨酸腦啡肽抗體規(guī)格: 0.1ml CW-2(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

嗜熱假諾卡氏菌 Pseudonocardia thermophila

Western Blot封閉液Ⅱ(奶粉,pH7.5)/Blocking Buffer(milk)100ml,、500ml100ml500ml

暫無 Microbacterium ammoniaphilum

漏斗狀側(cè)耳 Pleurotus sajor-caju

神經(jīng)母細(xì)胞瘤英文名稱:LAN-6

香菇 Lentinula edodes

COLO 205(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

不吸水鏈霉菌 Streptomyces ahygroscopocus

人胚肺成纖維樣細(xì)胞(男)英文名稱:HEL1

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

異常漢遜酵母 Hansenula anomala

鏈霉菌 Streptomyces sp.

Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測試劑盒規(guī)格:20

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

平沙綠僵菌 Metarhizium pingshaense

人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

A549/DDP, 人肺腺耐藥細(xì)胞株 Human

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

SK-N-BE(2) (人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

溝腸桿菌 Enterobacter cloacae

球毛殼菌 Chaetomium globosum

人凝血酶原(PT)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 黃芪甲苷規(guī)格:100mg/支,;98%

人間充質(zhì)干細(xì)胞- Human

異常畢赤酵母 Pichia anomala

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

Kidins220  220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

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