詳細(xì)介紹
人鞘磷脂(SM)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱:Human sphingomyelin,SM ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,,特異性強(qiáng),,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定,、易保存,,操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題,,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換,。
人鞘磷脂(SM)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
人鞘磷脂(SM)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,,效期內(nèi)使用,,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用,。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘,。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,標(biāo)本可存放于2~8℃,。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,,避免反復(fù)凍融,。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,,否則將降低精確度,,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,,以便使孔中的液體充分混勻,。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,,有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示,。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,,室溫放置至少30分鐘,。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,,吸頭,,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,,充分混勻待用,。)
人鞘磷脂(SM)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔,、陽性對(duì)照 2 孔,、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰,、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照,、陽性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,,然后再加待測(cè)樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,,拍干,。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外,。
7.溫育:操作同 3,。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm 波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
AK6 P21蛋白激活的蛋白激酶6抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-cardiac Troponin I(Thr143) 磷酸化心肌肌鈣蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
C21ORF62 21號(hào)染色體開放閱讀框62抗體規(guī)格: 0.2ml
C4orf42 4號(hào)染色體開放閱讀框42抗體規(guī)格: 0.2ml
Snake(Agkistrodonhaly) poison Protein 蛇毒蛋白抗體(蝮蛇)規(guī)格: 0.2ml
TGF beta R2/TGFBR2 轉(zhuǎn)移生因子β受體2抗體(TGF-βRⅡ)規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Tie2 (Ser1119) 磷酸化管生成素受體2抗體規(guī)格: 0.1ml
CRLF2 胸基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素受體抗體規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Tuberin/TSC2 (Tyhr927) 磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體規(guī)格: 0.1ml
C5orf51 5號(hào)染色體開放閱讀框51抗體規(guī)格: 0.2ml
Factor XI 凝因子11抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-PTPN7(Ser93) 磷酸化非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗體規(guī)格: 0.1ml
phgophs-ATG4C(Ser451) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體規(guī)格: 0.1ml
Phospho-PAK4(Ser474)/PAK5(Ser602)/PAK6(Ser560) 磷酸化p21激活激酶4/5/6抗體規(guī)格: 0.1ml
RXR Alpha/RXRA/Retinoid X receptor 核受體RXRα抗體規(guī)格: 0.1ml
ANGPTL1/Angiopoietin 1/ANG-1 管生成素-1抗體規(guī)格: 0.1ml
SRC src原基因抗體規(guī)格: 0.2ml
CA I/Carbonic anhydrase 1 碳酸酐酶1抗體規(guī)格: 0.2ml
TUSC1 肺抑蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
COX4/COX IV-1 細(xì)胞色素c氧化酶IV亞型1抗體規(guī)格: 0.2ml
NLRP10 富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白10抗體規(guī)格: 0.2ml大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
胰凝蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
百脈根根瘤菌 Rhizobium loti
P388D1(小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
雙孢蘑菇
羊IgG1 ml國產(chǎn)
小鼠腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
不動(dòng)桿菌 Acinetobacter sp.
EJ(人膀胱細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
平菇 Pleurotus sp.
成人表皮角化細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.
平菇 Pleurotus sp.
人鞘磷脂(SM)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法顯影粉10包(10 × 250 ml)國產(chǎn)
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細(xì)胞
煙草節(jié)桿菌 Arthrobacter nicotianae
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
LoVo(人大腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
泡盛曲霉 Aspergillus awamori