我司全程提供細胞生物體,、生長特性,、來源、器官,、類型,、形態(tài)、培養(yǎng)條件,、應(yīng)用,、組織、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細胞株說明書信息,，我們專業(yè)您的細胞系實驗,，讓您實驗再無煩擾！產(chǎn)品僅用于科研

名稱    小鼠成骨細胞
2.組織來源：顱骨組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

小鼠成骨細胞分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方,，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成,。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié),，起著保護和支持腦,、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分,。腦顱位于顱的后上部,，內(nèi)有顱腔，容納腦,，共8塊,。面顱為顱的前下部分，包含眶,、鼻腔,、口腔等結(jié)構(gòu)，構(gòu)成面部的支架,，共15塊,。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞，負責(zé)骨基質(zhì)的合成,、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建,，骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區(qū)域,，分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì)，分泌蛋白酶消化骨基質(zhì),，形成骨吸收陷窩,；其后，成骨細胞移行至被吸收部位,，分泌骨基質(zhì),，骨基質(zhì)礦化而形成新骨；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵,。成骨細胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機制,、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細胞學(xué)基礎(chǔ)，也是藥物篩選,、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段,。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠成骨細胞采用先用短時間消化、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠成骨細胞經(jīng)ALP染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形,、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,，同時，可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備,。

使用方法：
收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精消毒,，拆下封口膜，放入37℃,，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右,；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
裂殖壺菌   紫晶口磨

蘇云金芽胞桿菌柏氏變種 Bacillus thuringiensis var. berliner   甲型副傷

棒曲霉   紫色鏈霉菌

紫色直絲鏈霉菌   伴放線放線桿菌

嗜熱脂肪芽孢桿菌凍干粉   血瓊脂平板(BAP)[血平板]90mm
大鼠神經(jīng)軟骨蛋白(NCDN)elisa檢測試劑盒

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小鼠成骨細胞人γ-半合成酶(γ-GCS)elisa檢測試劑盒

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細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。