我司全程提供細胞生物體,、生長特性,、來源,、器官,、類型,、形態(tài),、培養(yǎng)條件,、應用,、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息,，我們專業(yè)您的細胞系實驗,，讓您實驗再無煩擾！產(chǎn)品僅用于科研

名稱    軟骨細胞
2.組織來源：軟骨組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介：

人軟骨細胞分離自軟骨組織,；軟骨組織由軟骨細胞,、基質(zhì)及纖維構成。軟骨組織再生能力強，這些增生的幼稚細胞形似纖維母細胞,，以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣毎?，并形成軟骨基質(zhì)，細胞被埋在軟骨陷窩內(nèi)而變?yōu)殪o止的軟骨細胞,。根據(jù)軟骨組織內(nèi)所含纖維成分的不同,，可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種,，其中以透明軟骨的分布較廣,，結構也較典型。軟骨細胞（chondrocyte）位于軟骨陷窩內(nèi),。幼稚的軟骨細胞位于軟骨組織的表層,，單個分布，體積較小,，呈橢圓形,，長軸與軟骨表面平行，越向深層的軟骨細胞體積之間增大呈圓形,，細胞核圓形或卵圓形,，染色淺，細胞質(zhì)弱嗜堿性,，常見數(shù)量不一的脂滴,。成熟的軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,，稱為同源細胞群,。電鏡下，軟骨細胞有突起和皺褶,，細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體,。在組織切片中，軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,，在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙,。體外培養(yǎng)的軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的人軟骨細胞采用膠原酶-聯(lián)合消化制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人軟骨細胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2~3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形,、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,，根據(jù)要求可始終保持細胞活力,，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,，包括活細胞的形態(tài),、結構、生命活動等,。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,，同時，可以施加化學,、物理,、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學,、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備,。

使用方法：
收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精消毒,，拆下封口膜，放入37℃,，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右,；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
硫酸慶大霉素溶液 ,15mg/mL2mL  T3 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次

硫酸卡那霉素溶液 ,50mg/mL10mL  T1 感受態(tài)細胞10×100μL

硫酸卡那霉素干粉1g  SYBR Green II 核酸染料100 μL

 C 溶液 ,5mg/mL10mL  SURE 化學感受態(tài)細胞0.1mL×10

硫酸新霉素干粉1g  Superoxide dismutase( 抗氧化酶 )2mg
大鼠髓鞘堿性蛋白（MBP）elisa檢測試劑盒

大鼠髓系細胞觸發(fā)受體-1 TREM-1 elisa檢測試劑盒

大鼠糖化血紅蛋白（A1C）elisa檢測試劑盒

大鼠糖原磷酸化酶同工酶BB, GP-BB elisa檢測試劑盒

大鼠天冬氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）elisa檢測試劑盒
軟骨細胞人白介素增強子結合因子2(ILF2/NF45/PRO3063)elisa檢測試劑盒

人白三烯B4(LTB4)elisa分析檢測試劑盒

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人白三烯C4(LTC4)elisa分析檢測試劑盒
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號21875-091)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。