我司全程提供細(xì)胞生物體,、生長特性,、來源、器官,、類型,、形態(tài),、培養(yǎng)條件、應(yīng)用,、組織,、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說明書信息，我們專業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn),，讓您實(shí)驗(yàn)再無煩擾,！產(chǎn)品僅用于科研

名稱    小鼠角膜上皮細(xì)胞
2.組織來源：眼角膜組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

小鼠角膜上皮細(xì)胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜,，約占纖維膜的前1/6,，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形,。角膜厚度各部分不盡相同,，中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,，如有外物接觸角膜,，眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛,。為了保持透明,，角膜并沒有血管，透過外界空氣,、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣,。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細(xì)胞層,、前彈力層,、基質(zhì)層、后彈力層,、內(nèi)皮細(xì)胞層,。其主要功能如下：①角膜是的無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能,，分三層細(xì)胞層,，外層即是上皮細(xì)胞；②角膜上皮細(xì)胞能參與先天性免疫,，能感應(yīng)病原體存在并發(fā)出信號(hào)從而激活角膜防御系統(tǒng),；③角膜上皮細(xì)胞能高效表達(dá)醛脫氫酶。角膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)對(duì)研究角膜的生理學(xué),、病理學(xué),、免疫學(xué)以及分子生物學(xué)都是極為重要的手段，常用于研究細(xì)胞代謝產(chǎn)物,、病毒感染,、各種生長因子和藥物對(duì)細(xì)胞生長的影響。

5.方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠角膜上皮細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠角膜上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,，同時(shí)，可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí),，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。

使用方法：
收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精消毒,，拆下封口膜，放入37℃,，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右,；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃,，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
盲腸腸球菌   蘇云金芽胞桿菌熊本亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kumamotoensis

血瓊脂平板(BAP)[血平板]70mm   蘇云金芽胞桿菌庫爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Kurstaki

產(chǎn)黃纖維單胞菌   蘇云金芽胞桿菌九州亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kyushuensis

綠針假單胞菌   鼠傷寒沙門菌CMCC50115凍干粉

膠紅酵母   調(diào)料葡萄球菌
大鼠細(xì)胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠角膜上皮細(xì)胞人穿孔素/成孔蛋白(PRF1/PFP)elisa分析檢測(cè)試劑盒

人穿孔素/成孔蛋白(PRF1/PFP)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

人串珠素elisa檢測(cè)試劑盒

人垂草扁桃酸(VMA)elisa分析檢測(cè)試劑盒

人垂草扁桃酸(VMA)elisa檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。