細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度,、氧氣,、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,，同時(shí)，可以施加化學(xué),、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞,，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。

名稱(chēng)    A-375 (惡性黑色素瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱(chēng) A 375; A375; A375-MEL; A375-mel; A375mel

種屬 人類(lèi)

年齡（性別） 女性,，54歲

組織來(lái)源 皮膚；惡性黑色素瘤

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述 A-375細(xì)胞源自一位54歲女性,，是由D·J·Giard等人建立的一系列細(xì)胞株中的一株,。A-375細(xì)胞在抗胸腺細(xì)胞球蛋白、血清處理的NIH瑞士小鼠中形成類(lèi)似于惡性黑素瘤的快速增長(zhǎng)的皮下腫瘤,；A-375在普通成纖維細(xì)胞和瓊脂上形成克隆,。

生物安全等級(jí) 1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~24-32小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in immunosuppressed mice.

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1619 ATCC; CRL-7904 BCRC; 60039 BCRJ; 0278

使用方法：
收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精消毒，拆下封口膜,，放入37℃,，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框18抗體

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框21抗體

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框45抗體

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框47抗體
大鼠酸性磷酸酶(ACP)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF/FGF-1)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠酸性β葡萄糖苷酶(GBA)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠松弛肽/松弛素1(RLN1)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

大鼠絲裂原激活的蛋白激酶1/MAP激酶1(MAPK1)elisa檢測(cè)試劑盒
A-375 (惡性黑色素瘤細(xì)胞)DMEM低糖培養(yǎng)基 500ml

DMEM高糖培養(yǎng)基 500ml

DMEM無(wú)糖培養(yǎng)基 500ml

DNA Ladder 1000 60T

DNA Ladder 2000 60T
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