我司全程提供細(xì)胞生物體,、生長(zhǎng)特性,、來(lái)源,、器官、類(lèi)型,、形態(tài),、培養(yǎng)條件、應(yīng)用,、組織,、凍存條件等復(fù)蘇及凍存細(xì)胞株說(shuō)明書(shū)信息,，我們專(zhuān)業(yè)您的細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)，讓您實(shí)驗(yàn)再無(wú)煩擾,！產(chǎn)品僅用于科研

名稱(chēng)    Daudi (Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱(chēng) DAUDI; NK-10A; NK-10a; NK 10a; NK10a; GM03190; GM3190; GM17346

種屬 人類(lèi)

年齡（性別） 男性,，16歲

組織來(lái)源 外周血；B淋巴母細(xì)胞,；Burkitt's淋巴瘤

生長(zhǎng)特性 懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣

背景描述 Daudi細(xì)胞是由E·Klein和G·Klein于1967年5月從一位16歲黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者建立的,。Daudi細(xì)胞表面免疫球蛋白陽(yáng)性(sIg+)、Β2-微球蛋白陰性,，EBNA陽(yáng)性,，并有衣殼抗原VCA；Daudi細(xì)胞攜帶EB病毒,。Daudi細(xì)胞是典型的B淋巴母細(xì)胞,，廣泛應(yīng)用于白血病發(fā)生機(jī)理的研究。

生物安全等級(jí) 2

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~24-48小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice; forms colonies in agarose.

受體表達(dá)情況 complement, expressed; Fc, expressed

注意事項(xiàng) 該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,，請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液,；請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CCL-213 BCRC; 60192 Coriell; GM03190 Coriell; GM17346 DSMZ; ACC-78 ECACC; 85011437 ECACC; 94071449
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,，包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等,。

2.研究條件可以人為控制

pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,，同時(shí),，可以施加化學(xué)、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞,，需要時(shí),，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。

使用方法：
收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。

1.取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精消毒,，拆下封口膜，放入37℃,，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2.待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

3.細(xì)胞傳代

1)吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2)添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右,；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化,；

3)用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

4)待細(xì)胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。

4× 核酸液相雜交液10mL  核酸清除劑1.5mL

DNA 稀釋液10mL  核苷酸類(lèi)似物法易錯(cuò) PCR 試劑盒15 次

DNA 溶解液10mL  海藻糖溶液,，1.5M，PCR 級(jí)1.5mL

微量雙鏈 DNA 定量試劑盒1mL  海量 PCR 片段純化試劑盒5次

微量單鏈 DNA 定量試劑盒1mL  還原劑兼容型 BCA 蛋白定量試劑盒250 次
大鼠膜相關(guān)磷脂酶A2(PLA2G2A)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

大鼠膜聯(lián)蛋白IV(ANX-IV)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠膜聯(lián)蛋白I(ANX-I)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素(AMH)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
Daudi (Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒250T

XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒500T

X線膠片 100張

YT培養(yǎng)基 YT Broth 250g

α1微球蛋白α1- MG試劑盒 R1：40ml×1 R2：10ml×1 膠乳增強(qiáng)
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號(hào)21875-091),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。