細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu),、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí),，可以施加化學(xué),、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞,，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

名稱    ME-180 (子宮頸表皮癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱 Me-180; ME 180; ME180

種屬 人類(lèi)

年齡（性別） 女性,，66歲

組織來(lái)源 宮頸表皮樣癌網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移灶

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述 ME-180細(xì)胞來(lái)源于一個(gè)細(xì)胞集落不規(guī)則沒(méi)有顯著角質(zhì)化的侵染性鱗狀細(xì)胞癌,。單層培養(yǎng)的ME-180細(xì)胞間可以觀察到帶狀連接，也注意到有細(xì)胞質(zhì)張力絲,。1970年,，發(fā)現(xiàn)支原體污染并去除。TNF-α抑制ME-180細(xì)胞的生長(zhǎng),；ME-180細(xì)胞含有人乳頭瘤病毒DNA,，與HPV-39的同源性高于HPV-18。

生物安全等級(jí) 2

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 McCoy's 5A＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~36小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice; forms well differentiated epidermoid carcinoma (grade I).

抗原表達(dá)情況 Blood Type A; Rh+; HLA A1, A11, B5(+/-), B40

基因表達(dá)情況 Oncogenes: p53+; pRB+

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-33

使用方法：
收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒,，拆下封口膜,，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS清洗細(xì)胞一次,；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右,；倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化,；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,，放入37℃,，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲(chǔ)存,。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

ATP 溶液,，100mM0.25mL  第七章 蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品

ATP 溶液,，2.5mM2mL  第六章 “克必隆"克隆及表達(dá)產(chǎn)品

UTP 溶液，100mM0.25mL  第二章 “天凈沙"DNA純化產(chǎn)品

UTP 溶液,，2.5mM2mL  地塞米松溶液 ,50mg/mL1mL

GTP 溶液,，100mM0.25mL  低載量 PCR 片段純化試劑盒50 次
大鼠肺炎病毒抗體(PV-Ab)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa檢測(cè)試劑盒
ME-180 (子宮頸表皮癌細(xì)胞)大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠70kDa熱休克蛋白5(HSPA5)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠70kDa熱休克蛋白8(HSPA8)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)elisa分析檢測(cè)試劑盒

大鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)elisa檢測(cè)試劑盒
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