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當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> Raji (Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌R&D/美國
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時間:2022-04-02 11:30:47瀏覽次數(shù):272次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)95-D PLA-801D (高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | GOY-01X0188 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | GOY-01X0188 |
名稱 Raji (Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確)
別稱 RAJI; P1-Raji; GM04671
種屬 人類
年齡(性別) 男性,11歲
組織來源 B淋巴細(xì)胞,;Burkitt's淋巴瘤
生長特性 懸浮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
背景描述 Raji細(xì)胞株源自一位11歲黑人男孩的左上頜骨的Burkitt's淋巴瘤,;EBNA陽性。
生物安全等級 2
生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 4×10^5cells/mL
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時間 ~24-36小時
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
溫度:37℃
注意事項 該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,,請注意離心收集細(xì)胞懸液,;請勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CCL-86 ATCC; CRL-7936DSMZ; ACC-319 ECACC; 85011429
實驗報告:
產(chǎn)品僅用于科研一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
BIVM蛋白抗體
血型Lewis A抗原抗體
粘蛋白/巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶3抗體
Bloom綜合征相關(guān)蛋白抗體
骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體
大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)elisa檢測試劑盒
大鼠叉頭框蛋白P3(FoxP3)elisa檢測試劑盒
大鼠層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)elisa檢測試劑盒
大鼠層粘蛋白α1(LAMA1)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠層連蛋白/板層素(LN)elisa檢測試劑盒
Raji (Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞)大鼠ATP1B4蛋白(ATP1B4)elisa分析檢測試劑盒
大鼠ATP1B4蛋白(ATP1B4)elisa檢測試劑盒
大鼠ATP1B4蛋白(ATP1B4)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)elisa檢測試劑盒
大鼠Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax)elisa檢測試劑盒
冷凍保存細(xì)胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,,造成細(xì)胞大量死亡,,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些,。
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