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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>科研細(xì)胞>>細(xì)胞系>> P3X63Ag8 (小鼠骨髓瘤細(xì)胞)
參 考 價(jià) | 面議 |
產(chǎn)品型號
品 牌R&D/美國
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2022-04-06 10:47:54瀏覽次數(shù):276次
聯(lián)系我時(shí),,請告知來自 化工儀器網(wǎng)95-D PLA-801D (高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
貨號 | GOY-01X0180 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 | GOY-01X0180 |
名稱 P3X63Ag8 (小鼠骨髓瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確)
別稱 P3-X63-Ag8; P3/X63-Ag8; P3/X63/Ag8; P3-X63Ag8; P3X63 Ag8; X63-Ag8; X63-AG8; x63-Ag8; P3X63; X63; GM03571
種屬 小鼠
年齡(性別) 不詳
組織來源 B淋巴細(xì)胞,;漿細(xì)胞,;骨髓瘤
生長特性 懸浮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
背景描述 P3X63Ag8細(xì)胞源自P3K細(xì)胞株(源自漿細(xì)胞MOPC-21的組織培養(yǎng)株),P3X63Ag8能抗0.1mM 8-氮雜鳥嘌呤,,但在HAT培養(yǎng)基中死亡。據(jù)報(bào)道,,P3X63Ag8細(xì)胞是缺失了3-酮類固醇還原酶活性的營養(yǎng)缺陷型細(xì)胞,。
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 DMEM+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 2×10^5cells/mL
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~16-26小時(shí)
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
溫度:37℃
抗原表達(dá)情況 H-2d
基因表達(dá)情況 immunoglobulin; monoclonal antibody
注意事項(xiàng) 該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請注意離心收集細(xì)胞懸液,;請勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液,。
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; TIB-9 ECACC; 85011401
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),, 以防止冰晶過大,,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些,。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻,。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜),。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清,。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,,DMSO 終濃度為 10%,,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,,注意凍 存管做好標(biāo)識,。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
產(chǎn)品僅用于科研一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH (7-23)抗體
活性依賴的神經(jīng)保護(hù)肽抗體
α1酸性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體
α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2)
核突觸蛋白抗體
γ-谷氨酰半合成酶γ-GCS測試盒 100管/48樣 微量定磷法
ATP含量測試盒 100管/48樣 200T 比色法
硝酸還原酶NR測試盒 100管/48樣 50管/24樣 可見光比色法
蔗糖合成酶SS測試盒 48T 紫外比色法
蔗糖磷酸合成酶SPS測試盒 48T 紫外比色法
P3X63Ag8 (小鼠骨髓瘤細(xì)胞)大鼠凝血因子ⅩⅢA1肽(F13A1)elisa檢測試劑盒
大鼠凝血因子Ⅺ(F11)elisa檢測試劑盒
大鼠凝血因子Ⅻ(F12)elisa檢測試劑盒
大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)elisa檢測試劑盒
大鼠凝血因子IX(FIX)elisa檢測試劑盒
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