培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,，加入約 8ml 培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次,。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化,。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為類,；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS 清洗一遍后加入 1ml ,，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%,，細(xì)胞密度不低于1x106/ml,，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí),。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

產(chǎn)品屬性：

名稱    P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確)
別稱 P3/NSI/1-AG4-1; P3/NS1/1-Ag4-1; P3/NS1/1-AG4-1; P3/NS1/Ag4-1; P3 NS1 Ag4/1; P3 NS1 Ag4; P3.NS-1/1.Ag4.1; P3-NS1/1-Ag4-1; P3-NS1/1Ag 4.1; P3/NS-1; NS1/1-Ag4.1; NS1-1 Ag4.1; NS-1-Ag4-1; NS1-Ag4/1; NS1-Ag 4/1; NS1-Ag4; P3X63NS1; NS-I/1; NS-1; NS1; GM03573; GM-3573

種屬 小鼠

年齡（性別） 不詳

組織來源 B淋巴細(xì)胞；漿細(xì)胞,；骨髓瘤

生長(zhǎng)特性 懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣

背景描述 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]是P3X63Ag8細(xì)胞的一個(gè)不分泌克隆,。Kappa鏈合成了但不分泌，能抗0.1mM 8-氮雜鳥嘌呤,，但不能在HAT培養(yǎng)基中生長(zhǎng),。據(jù)報(bào)道,，P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細(xì)胞是缺失了3-酮類固醇還原酶活性的營(yíng)養(yǎng)缺陷型細(xì)胞。

生物安全等級(jí) 1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~24小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

溫度：37℃

抗原表達(dá)情況 H-2d

基因表達(dá)情況 immunoglobulin (not secreted), H-2d

注意事項(xiàng) 該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,，請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液,；請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; TIB-18 DSMZ; ACC-145 ECACC; 85011427

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
產(chǎn)品僅用于科研一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大提柱式植物 RNAout5次  柱式細(xì)菌 RNAout50 次

柱式植物 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次  柱式細(xì)菌 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次

柱式藻類 RNAout50 次  柱式細(xì)菌 DNAout50 次

大提柱式藻類 RNAout5次  柱式細(xì)菌 DNAout( 含 )50 次

土壤 RNAout50 次  柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout50 次
大鼠C型鈉尿肽(CNP)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠C肽(C-Peptide)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠CXC趨化因子受體5(CXCR5)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠CXC趨化因子受體4(CXCR4)elisa檢測(cè)試劑盒
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細(xì)胞)大鼠小白蛋白(PVALB)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠心肌肌鈣蛋白C(TnC)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠心肌肌鈣蛋白C(TnC)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)

大鼠心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)elisa檢測(cè)試劑盒

冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。