細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控,、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構,、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度,、氧氣、二氧化碳,、張力等物理化學的條件,，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時,，可以施加化學,、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下,。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,，需要時,，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察,、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細胞術,、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學,、原位雜交,、同位素標記等各種儀器設備,。

名稱    OKT 3 (小鼠雜交瘤細胞(抗CD3))
別稱 OKT3

種屬 小鼠(B細胞)，小鼠（骨髓瘤細胞）

年齡（性別） 不詳

組織來源 脾臟

生長特性 懸浮細胞

細胞形態(tài) 淋巴母細胞樣

背景描述 OKT 3細胞是一株用人外周血淋巴細胞免疫小鼠,，然后取免疫小鼠的脾細胞與P3X63Ag8.U1骨髓瘤細胞融合而建株的細胞系,。

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 IMDM＋20% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

溫度：37℃

注意事項 該細胞為懸浮細胞，請注意離心收集細胞懸液,；請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液,。

保藏機構 ATCC; CRL-8001 ECACC; 86022706

使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精消毒，拆下封口膜,，放入37℃,，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次,；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃,，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察,。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091),，90%,；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

蛋酸酶抑制劑混合液 11mL  PCR 抑制物清除劑1mL

蛋酸酶抑制劑混合液 21mL  PCR 污染清除劑500mL

細菌蛋白酶抑制劑10mL  PCR 法 DNA 探針標記試劑盒 5次

哺乳動物蛋白酶抑制劑1mL  PCR 法 DNA 探針標記試劑盒5次

植物蛋白酶抑制劑1mL  PCR Mix 染料10mL
大鼠P物質受體(SP-R)elisa檢測試劑盒

大鼠P物質(SP)elisa檢測試劑盒

大鼠P53(P53)elisa檢測試劑盒

大鼠P27蛋白(P27)elisa檢測試劑盒免費代測

大鼠P21蛋白(P21)elisa檢測試劑盒
OKT 3 (小鼠雜交瘤細胞(抗CD3))大鼠血栓素合成酶(TXAS)elisa檢測試劑盒免費代測

大鼠血栓調節(jié)蛋白(TM)elisa檢測試劑盒

大鼠血栓調節(jié)蛋白(TM)elisa檢測試劑盒免費代測

大鼠血纖蛋白原(Fbg)elisa檢測試劑盒

大鼠血纖蛋白原降解產物(FDP)elisa檢測試劑盒
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