詳細(xì)介紹
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控,、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,,包括活細(xì)胞的形態(tài),、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制
pH,、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,,同時(shí),,可以施加化學(xué)、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下,。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類(lèi)型的細(xì)胞,,需要時(shí),,可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡,、熒光顯微鏡、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù),、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué),、原位雜交,、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0204 |
名稱(chēng) Sf9 (昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞)
別稱(chēng) SF9; sf9; SF-9; Sf-9; sf-9; Sf 9; Spodoptera frugiperda clone 9; Sf clone 9; IPLB-Sf-9AE; IPLB-SF-9AE; IPLB-SF-9; IPLB-Sf-9; IPLB-Sf9
種屬 草地貪夜蛾
年齡(性別) 蛹
組織來(lái)源 卵巢
生長(zhǎng)特性 半貼半懸
細(xì)胞形態(tài) 圓形
背景描述 Sf9細(xì)胞是源于雌性草地貪夜蛾蛹的卵巢組織,,可以用于復(fù)制桿狀病毒表達(dá)載體,。
生物安全等級(jí) 1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 TNM-FH+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 5×10^5-1×10^6cells/mL
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~27-50小時(shí)
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,100%,;
溫度:28℃
注意事項(xiàng) 該細(xì)胞為28℃培養(yǎng),,不通二氧化碳,請(qǐng)?zhí)崆皽?zhǔn)備專(zhuān)用培養(yǎng)箱,。
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1711 DSMZ; ACC-125 ECACC; 89070101
圖
使用方法:
收到細(xì)胞后,,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,,75%酒精消毒,拆下封口膜,,放入37℃,,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次,;
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,,再加入*培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
4) 待細(xì)胞*貼壁后,,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,,貨號(hào)21875-091),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
多粘芽孢桿菌 產(chǎn)朊假絲酵母
魯氏接合酵母 銅綠假單孢菌
產(chǎn)氣腸桿菌凍干粉 枯草芽孢桿菌 中性蛋白酶(2000V/mL)
褐球固氮菌 運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單孢菌
韓國(guó)叢毛單胞菌 近平滑念珠菌ATCC22019凍干粉
大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素1β前體(pro-IL1B)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素1β(IL-1β)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠白介素1α(IL-1α)elisa檢測(cè)試劑盒
Sf9 (昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞)大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 TFR elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體 TRFR elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)elisa檢測(cè)試劑盒
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