細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等,。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣,、二氧化碳,、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,,同時(shí),,可以施加化學(xué)、物理,、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化,。
4.研究?jī)?nèi)容便于觀察,、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡,、電子顯微鏡,、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡,、免疫組織化學(xué),、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備,。
![88.jpg 88.jpg](https://img72.chem17.com/6fd5d5abffebbb9e53fdab16daa3bfc6bde969098f672f480acb890c71042568e5af405a17cadc80.jpg)
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
ST (豬睪丸細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0218 |
名稱 ST (豬睪丸細(xì)胞)
別稱 Swine Testis; STOMA24; Stoma 24; ST-IOWA; ATCC-ST
種屬 野豬
年齡(性別) 80-90日齡
組織來(lái)源
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
背景描述 ST細(xì)胞是由Mcclurkin·A· W等人于1960年建系,。ST細(xì)胞一般用于病毒增殖和分離,是豬細(xì)小病毒的理想宿主,;ST細(xì)胞可用于這類病毒的分離及增殖,。
生物安全等級(jí) 1
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 MEMMEM(PM150467 )(ATCC改良)(PM150467 )+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~30-40小時(shí)
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
溫度:37℃
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1746 DSMZ; ACC-641 ECACC; 92040221
![圖片2.jpg 圖片2.jpg](https://img76.chem17.com/6fd5d5abffebbb9e53fdab16daa3bfc687183e52462e599a1bfcf6f51ff2786e5e60e9e0600a9e75.jpg)
使用方法:
收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作,。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,,75%酒精消毒,拆下封口膜,,放入37℃,,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,,37℃溫浴3min左右,;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,,再加入*培養(yǎng)液終止消化,;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,,然后補(bǔ)充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
4) 待細(xì)胞*貼壁后,,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基,。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,,貨號(hào)21875-091),90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
多粘菌素 B 硫酸鹽5mL Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制劑 )1g
嘌呤霉素干粉25mg SP600125(JNK 抑制劑 )5mg
利福平溶液 ,100mg/mL10mL SP6 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒50 次
壯觀霉素溶液 ,50mg/mL10mL Southern 專用 DNA Marker(DIG)20 次
鏈脲佐菌素溶液 ,10mg/mL10mL Southern 專用 DNA Marker( )20 次
大鼠白介素1α(IL-1α)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素1β(IL-1β)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素1受體(IL-1RⅠ)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素2(IL-2)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素23(IL-23)elisa檢測(cè)試劑盒
ST (豬睪丸細(xì)胞)大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGF-β2)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2受體(TGF-β2R)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGFβ3)elisa檢測(cè)試劑盒
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